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斑马鱼基因ATF4多克隆抗体的制备
引用本文:李发祥,杨荣,陈婷芳,唐雄卓,赵碧峰,江志钢,张义,李永青,吴秀山. 斑马鱼基因ATF4多克隆抗体的制备[J]. 激光生物学报, 2012, 21(1): 56-59
作者姓名:李发祥  杨荣  陈婷芳  唐雄卓  赵碧峰  江志钢  张义  李永青  吴秀山
作者单位:湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30930054)
摘    要:ATF4是含有bZIP结构域的ATF/CREB转录因子家族成员,对胚胎的发育以及细胞的增殖、分化有重要的调节作用。制备ATF4的多克隆抗体对于研究其在斑马鱼心脏发育过程中的作用有重要的意义。研究首先通过生物信息学方法,选择ATF4基因中特异性强、具亲水性的一段核苷酸序列(1017bp),通过PCR扩增,将片段重组到原核表达载体pET-28a,然后转化入Rosetta菌株中。经测序鉴定正确后,用IPTG诱导表达融合蛋白,以该融合蛋白免疫小鼠,获得ATF4多克隆抗鼠血清。对该多抗血清抗体进行验证,具有很好特异性和较高效价,可以用作Western—blotting、免疫印迹等试验分析。

关 键 词:ATF4  融合蛋白  多克隆抗体

Preparation of Polyclonal Antibody of ATF4 in Zebrafish
LI Faxiang,YANG Rong,CHEN Tingfang,TANG Xiongzhuo,ZHAO Bifeng,JIANG Zhigang, ZHANG Yi,LI Yongqing,WU Xiushan. Preparation of Polyclonal Antibody of ATF4 in Zebrafish[J]. ACTA Laser Biology Sinica, 2012, 21(1): 56-59
Authors:LI Faxiang  YANG Rong  CHEN Tingfang  TANG Xiongzhuo  ZHAO Bifeng  JIANG Zhigang   ZHANG Yi  LI Yongqing  WU Xiushan
Affiliation:* (The Center for Heart Development,Key Lab of MOE for Development Biology and Protein Chemistry, Hunan Normal University,Changsha 410081,Hunan,China)
Abstract:
Keywords:ATF4  fusion protein  polyclonal antibody
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