利用DNA免疫技术制备果蝇GBB多克隆抗体及其表达模式的分析

TGF-β信号家族在生物体生命活动中具有多种发育和生理功能。研究该信号家族在生物体内的表达模式具有重要的意义。gbb是TGF-β信号成员bmp7的果蝇同源基因,为了进一步研究gbb对胚胎发育的影响,本文采用DNA免疫技术制备得到果蝇GBB多克隆抗体。首先提取果蝇总RNA,反转录得到cDNA文库,以该文库为模板克隆出gbb基因编码区序列,构建成真核表达质粒pCAGGS-P7/gbb。采用DNA免疫技术免疫BALB/c小鼠,取心血分离血清制备了GBB多克隆抗体。免疫印迹试验表明制备的GBB多克隆抗体有效,果蝇胚胎免疫荧光分析表明GBB在果蝇胚胎发育0～9 h无明显表达,9 h之后开始高效表达。