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利用DNA免疫技术制备SAX蛋白多克隆抗体
引用本文:查浩浩,胡敏,李玉玲,丰琳,江志钢. 利用DNA免疫技术制备SAX蛋白多克隆抗体[J]. 激光生物学报, 2019, 28(4): 368-373
作者姓名:查浩浩  胡敏  李玉玲  丰琳  江志钢
作者单位:湖南师范大学,心脏发育研究中心,长沙410081;湖南师范大学,心脏发育研究中心,长沙410081;湖南师范大学,心脏发育研究中心,长沙410081;湖南师范大学,心脏发育研究中心,长沙410081;湖南师范大学,心脏发育研究中心,长沙410081
摘    要:骨形态发生蛋白(BMP)属于细胞因子和转化生长因子β(TGF-β)超家族,在胚胎形态发生和器官形成中起重要作用,但目前缺乏BMP信号通路I型受体SAX的各类抗体。本文利用果蝇胚胎提取出总RNA,反转录得到cDNA,将其作为模板通过PCR得到sax基因片段,将片段连接到pCAGGS-P7上,构建成重组质粒pCAGGS-P7-sax。采用质粒DNA免疫技术,免疫了BALB/C小鼠,制备了果蝇SAX蛋白多克隆抗体。进一步分析表明,构建的真核表达重组质粒pCAGGS-P7-saxDNA具有良好的免疫原性,在免疫小鼠后所获得的抗血清抗体效价达1∶100。Western blot和果蝇胚胎免疫荧光检测表明,抗血清能特异型地识别SAX蛋白。果蝇SAX抗体的成功制备为进一步研究sax基因及BMP信号在果蝇心脏发育中的作用奠定了基础。

关 键 词:SAX  DNA免疫技术  免疫荧光

Preparation of Polyclonal Antibody Against SAX Protein by DNA Immunization
ZHA Haohao,HU Min,LI Yuling,FENG Lin,JIANG Zhigang. Preparation of Polyclonal Antibody Against SAX Protein by DNA Immunization[J]. ACTA Laser Biology Sinica, 2019, 28(4): 368-373
Authors:ZHA Haohao  HU Min  LI Yuling  FENG Lin  JIANG Zhigang
Affiliation:(The Center for Heart Development Key Laboratory,Changsha 410081,China)
Abstract:ZHA Haohao;HU Min;LI Yuling;FENG Lin;JIANG Zhigang(The Center for Heart Development Key Laboratory,Changsha 410081,China)
Keywords:sax  DNA immunoassay  immunofluorescence
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