| 白蚁内切-β—1，4-葡聚糖酶基因的克隆、表达、纯化及酶学性质的研究 |
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| 引用本文： | 秦国梅,张建珍,黄艳燕,韦宇拓,杜丽琴,庞宗文,黄日波. 白蚁内切-β—1，4-葡聚糖酶基因的克隆、表达、纯化及酶学性质的研究[J]. 工业微生物, 2009, 39(5): 30-38. DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2009.05.006 |
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| 作者姓名： | 秦国梅 张建珍 黄艳燕 韦宇拓 杜丽琴 庞宗文 黄日波 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学生命科学与技术学院
2. 广西大学生命科学与技术学院;广西科学院,广西南宁,530004 |
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| 摘 要： | 提取了台湾家白蚁总RNA并反转录获得eDNA，PCR扩增出白蚁内切葡聚糖酶的基因，并将目的基因分别克隆到大肠杆菌和酿酒酵母载体中，构建了产内切-β-1，4-葡聚糖酶的基因工程菌。由于大肠杆菌会有少量的泄漏表达，而所用的酿酒酵母表达载体是本实验室构建带有INU信号肽的表达载体，故都可采用刚果红平板染色法筛选具有羧甲基纤维素酶（CMCase）活性的重组转化子。利用金属镍亲和层析对大肠杆菌表达的内切-β-1，4-葡聚糖酶进行纯化，CMC酶活检测显示纯化酶的最适温度和最适pH值分别为42℃、6．5；内切-β-1，4-葡聚糖酶的Vmax为0．071mg／mL·min，Km值为80．2712mg／mL。
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| 关 键 词： | 内切-β-1,4-葡聚糖酶 台湾家白蚁 酿酒酵母 |
Cloning, expression, purification and characterization of endoglucanase gene from Coptotermes formosanus |
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| Affiliation: | QIN Gou-mei, ZHANG Jian-zhen, HUANG Yan-yan, WEI Yu-tuo, DU Li-qin, PANG Zong-wen, HUANG Ribo(1. College of life Science and Technology, Guangxi University; 2. Guangxi Academy of Sciences. Nanning, Guangxi 530004, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | endo-β-1, 4-glucanase Coptotermes formosanus Saccharomyces cerevisiae |
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