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DNA甲基化对牛lgf-2r表达的影响及其在克隆牛发育中的作用
引用本文:蔡霞,龙健儿.DNA甲基化对牛lgf-2r表达的影响及其在克隆牛发育中的作用[J].动物学研究,2007,28(5):470-476.
作者姓名:蔡霞  龙健儿
作者单位:上海交通大学附属儿童医院医学遗传研究所,上海200040
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30500301),致谢:感谢上海交通大学附属医学遗传研究所曾溢滔教授对本研究的评论,任兆瑞教授对本文的修订.
摘    要:目前认为克隆效率低的主要原因是供体核的不完全重编程导致发育过程中一些重要的基因异常表达。运用DNA甲基化转移酶抑制剂5'-脱氧胞苷(5'-azacytidine,5'-aza)处理MDBK细胞(牛肾上皮细胞),并通过实时荧光定量PCR方法对lgf-2r基因的表达进行了定量分析;在此基础上,应用亚硫酸盐甲基化测序法检测正常牛及克隆牛脑、肺、心、肝组织lgf-2r印迹调控区DMR2(DNA differentially methylated region,DMR)及非印迹调控区3'-UTR(3'-untranslated region,UTR)的DNA甲基化水平。研究发现,5'-aza处理MDBK细胞后,lgf-2r基因的表达上调。正常牛各组织中lgf-2rDMR2区的DNA甲基化程度差异较大,3'-UTR区较稳定;与正常牛相比,克隆牛DMR2区的甲基化程度变化较大,3'-UTR区无显著性变化。结果表明,DNA甲基化修饰影响lgf-2r基因的表达。正常牛不同组织中lgf-2r基因DMR2区的DNA甲基化程度不同,提示lgf-2r基因的印迹调控方式在不同组织中可能不同。克隆牛发育过程中,调控lgf-2r基因印迹的DMR2表观结构被明显改变,而非印迹调控区3'-UTR则无明显变化,提示lgf-2r基因印迹调控区被破坏,很可能是导致克隆牛发育异常的一个重要原因。

关 键 词:lgf-2r  表观遗传  克隆牛  DNA甲基化  基因印迹
文章编号:0254-5853(2007)05-0470-07
修稿时间:2007-04-09

Effect of DNA Methylation on lgf-2r Expression in the Development of Cloned Cattle
CAI Xia, LONG Jian-er.Effect of DNA Methylation on lgf-2r Expression in the Development of Cloned Cattle[J].Zoological Research,2007,28(5):470-476.
Authors:CAI Xia  LONG Jian-er
Abstract:
Keywords:lgf-2r  Epigenetics  Cloned cattle  DNA methylation  Gene imprinting
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