| 金色链霉菌J13基因敲除体系的构建 |
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| 引用本文： | 方志锴,洪文荣,严凌斌.金色链霉菌J13基因敲除体系的构建[J].生物技术,2011,21(6). |
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| 作者姓名： | 方志锴 洪文荣 严凌斌 |
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| 作者单位： | 福州大学生物科学与工程学院,福建福州,350108 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,福建省教育厅科研项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立金色链霉菌基因敲除体系,敲除金色链霉菌J13中的ctcF基因,研究工程菌的代谢变化.方法:采用基因置换和框内缺失技术,对ctcF基因进行敲除.结果:利用接合转移的方法,将质粒pFD109导入到金色链霉菌J13中,经抗性筛选及PCR验证获得ctcF基因置换菌株金色链霉菌A1 - 20；将质粒pFD111经接合转移导入到A1 -20中,获得ctcF基因框内缺失菌株金色链霉菌K2-46；以上工程菌的发酵组分经HPLC分析,发现金霉素发酵单位显著降低.结论:获得的接合子发生双交换的概率可达18％以上,建立及验证了金色链霉菌基因敲除体系的实用性和可操作性,并初步推测ctcF为金霉素生物合成中的调控基因.
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| 关 键 词： | 金色链霉菌 ctcF 基因敲除 分子遗传工程 |
Constuction of the Gene Knockout System of Streptomyces aureofaciens J13 |
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| FANG Zhi-kai
,
HONG Wen-rong
,
YAN Ling-bin.Constuction of the Gene Knockout System of Streptomyces aureofaciens J13[J].Biotechnology,2011,21(6). |
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| Authors: | FANG Zhi-kai HONG Wen-rong YAN Ling-bin |
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