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| 小鼠TRAF6特异性shRNA慢病毒质粒的构建及活性 | |
| 引用本文： | 谢琪璇,罗峰,秋山泰身,井上纯一郎,秦俊文.小鼠TRAF6特异性shRNA慢病毒质粒的构建及活性[J].生物技术,2011,21(6). |
| 作者姓名： | 谢琪璇 罗峰 秋山泰身 井上纯一郎 秦俊文 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所,广东广州,510632 2. 东京大学医科学研究所分子发癌分野,日本东京108 -8639 3. 暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所,广东广州510632;暨南大学再生医学教育部重点实验室,广东广州510632 |
| 基金项目： | 广东省自然科学基金,教育部留学回国人员科研启动基金,中央高校基本科研业务费专项资金 |
| 摘 要： | 目的:构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒.方法:设计、合成小鼠TRAF6基因特异性shRNA核苷酸,将其链接入pENTR/U6载体,基因测序；通过LR克隆酶将pENTR/U6中的TRAF6特异性shRNA核苷酸插入CS -RfA -EG慢病毒载体,KpnⅠ限制酶切分析；通过慢病毒将TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒导入MEF13细胞中,FACS分析质粒导入率,同时利用Western blot技术检测MEF13细胞中TRAF6的表达以及磷酸化IκBα的表达.以LacZ基因特异性shRNA慢病毒质粒为对照.结果:构建的小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒与设计相符；MEF13细胞中慢病毒质粒的导入率为95％以上；与对照组比较,TRAF6基因特异性shRNA可长期、完全抑制MEF13细胞中TRAF6的表达及TRAF6介导的IκBα的磷酸化.结论:成功构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒. |
| 关 键 词： | TRAF6 慢病毒质粒 shRNA RNAi |
Lentiviral shRNA Plasmid Targeting Murine TRAF6 and Its Activity of Specific Genetic Interference |
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| XIE Qi-xuan , LUO Feng , AKIYAMA Taishin , INOUE Junichiro , QIN Jun-wen.Lentiviral shRNA Plasmid Targeting Murine TRAF6 and Its Activity of Specific Genetic Interference[J].Biotechnology,2011,21(6). | |
| Authors: | XIE Qi-xuan LUO Feng AKIYAMA Taishin INOUE Junichiro QIN Jun-wen |
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