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朱砂叶螨HSP90基因克隆及原核表达
引用本文:冯宏祖,刘映红,何林,李明,卢文才,薛传华.朱砂叶螨HSP90基因克隆及原核表达[J].昆虫学报,2009,52(8):845-851.
作者姓名:冯宏祖  刘映红  何林  李明  卢文才  薛传华
作者单位:1. 西南大学植物保护学院,重庆市昆虫学及害虫控制工程重点实验室,重庆,400716;塔里木大学植物科学学院,新疆阿拉尔,843300
2. 西南大学植物保护学院,重庆市昆虫学及害虫控制工程重点实验室,重庆,400716
摘    要:采用RT-PCR及RACE技术克隆朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus的热激蛋白90(HSP90)基因, 并进行序列分析, 得到一条长2 595 bp的cDNA序列, 该序列开放阅读框(open reading frame, ORF)为2 169 bp, 编码722个氨基酸, 分子量约为83.45 kDa, 理论等电点为4.81, 3′非编码区(untranslated region, UTR)为249 bp, 5′UTR为177 bp。通过Antheprot分析发现5个HSP90家族的签名序列及胞质HSP90特征序列MEEVD。同源性分析表明, 朱砂叶螨HSP90编码区核苷酸序列和其他已知的HSP90, 尤其是节肢动物昆虫的HSP90, 具有很高的相似性。将鉴定正确的原核重组表达质粒pET43a-TcHSP90, 转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(origami) 进行原核表达, 应用SDS-PAGE和Western blotting技术分离并检测融合蛋白, 结果表明构建的原核表达质粒可以在宿主菌中稳定、正确表达。朱砂叶螨TcHSP90基因的克隆、原核表达, 为进一步研究HSP90的性质和功能的研究提供有用的实验材料。

关 键 词:朱砂叶螨  热激蛋白90  基因克隆  序列同源性分析  原核表达  

Molecular cloning and prokaryotic expression of heat shock protein 90 (Hsp90) gene in Tetranychus cinnabarinus (Acari: Tetranychidae)
FENG Hong-Zu,LIU Yin-Hong,HE Lin,LI Ming,LU Wen-Cai,XUE Chuan-Hua.Molecular cloning and prokaryotic expression of heat shock protein 90 (Hsp90) gene in Tetranychus cinnabarinus (Acari: Tetranychidae)[J].Acta Entomologica Sinica,2009,52(8):845-851.
Authors:FENG Hong-Zu  LIU Yin-Hong  HE Lin  LI Ming  LU Wen-Cai  XUE Chuan-Hua
Abstract:
Keywords:Tetranychus cinnabarinus  heat shock protein 90  gene cloning  sequence homology analysis  prokaryotic expression
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