| 人干细胞因子cDNA的设计、合成与克隆 |
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| 引用本文： | 赵志虎,张京生,曹诚,马清钧.人干细胞因子cDNA的设计、合成与克隆[J].生物技术通讯,2002,13(1):26-29. |
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| 作者姓名： | 赵志虎 张京生 曹诚 马清钧 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 选择大肠杆菌的偏爱密码子，分成18个长约60个碱基且相互配对的寡核苷酸片段，合成了可溶形式的人干细胞因子（hSCF)的cDNA，合成片段经纯化、5′-端磷酸化后，通过PCR进行合成hSCF的cDNA一次性组装与扩增，得到了含有可溶形式的hSCF的全部编码区及EcoRⅠ、SalⅠ位点在内的全长共515个碱基对的DNA片段，回收该DNA片段，酶切消化，定向克隆进质粒pUC19。经酶切鉴定以及序列测定，得到了全序列正确的克隆株，为下一步的工作奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人干细胞因子 基因合成 聚合酶链式反应 cDNA 设计 克隆 |
| 文章编号： | 1009-0002(2002)01-0026-04 |
| 修稿时间： | 2001年7月17日 |
The design, chemical synthesis and cloning of the human stem cell factor cDNA |
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| ZHAOZhi-hu,CAOCheng,ZHANGJing-sheng,MA Qing-jun.The design, chemical synthesis and cloning of the human stem cell factor cDNA[J].Letters in Biotechnology,2002,13(1):26-29. |
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| Authors: | ZHAOZhi-hu CAOCheng ZHANGJing-sheng MA Qing-jun |
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| Abstract: | By selectingthehigh-usagecodonsin Escherichia coli,thesolubleformhSCFcDNA,consistof515base-pairs(bp),was dividedinto18oligonucleotidefragmentsandsynthesizedon ABI381AtypeDNAsynthesizer.Thesynthetic18fragmentswereassembledin onlyonestepby a PCRapproachandinsertedintopUC19for cloning.Thesequenceof the wholesyntheticgenewasconfirmedby DNAsequencing. |
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| Keywords: | hSCF genechemicalsynthesis PCR |
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