| 一种高效提取杨树发病树皮总RNA的方法及应用 |
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| 引用本文： | 侯佳,孙丰硕,吴秋明,杨玉巧,贺伟,王延伟. 一种高效提取杨树发病树皮总RNA的方法及应用[J]. 植物生理学通讯, 2014, 0(2): 223-228 |
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| 作者姓名： | 侯佳 孙丰硕 吴秋明 杨玉巧 贺伟 王延伟 |
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| 作者单位： | [1]北京林业大学森林培育与保护教育部重点实验室,北京100083 [2]北京林业大学林木育种国家工程实验室,北京100083 [3]北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室,北京100083 [4]北京林业大学国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室,北京100083 [5]濮阳市林业科学院,河南濮阳457000 |
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| 基金项目： | 资助国家自然科学基金青年基金（31200511）、国家林业公益性行业科研专项（201104054）和教育部博士点基金新教师类基金（20110014120004）。＊共同 |
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| 摘 要： | 对杨树发病树皮总RNA的高效提取是开展杨树抗溃疡病基因表达调控的基础,为了探讨杨树发病树皮RNA的高效提取方法,本研究以欧美杨细菌性溃疡病菌侵染后的‘中林46’杨为材料,比较了包括本研究提出的RNA提取新方法（RNA试剂盒改良法）在内的6种方法提取的总RNA的质量和浓度。结果显示,通过RNA试剂盒改良法提取的总RNA 28S rRNA条带亮度约为18S rRNA条带亮度的2倍且浓度高,表明该方法更适合感染欧美杨细菌性溃疡病的‘中林46’杨发病树皮总RNA的提取。为了验证RNA试剂盒改良法对健康杨树树皮及不同胁迫处理、组织RNA提取的适用性,进一步用该方法提取了‘中林46’杨、‘107’杨、‘北京’杨健康树皮,低氮、低磷处理的毛白杨组培苗以及白玉兰花的总RNA。结果表明,用RNA试剂盒改良法均能获取高质量的总RNA。所提取的总RNA已成功用于感染欧美杨细菌性溃疡病的杨树树皮转录组测序,以及低氮处理的毛白杨组培苗RT-PCR和荧光定量PCR实验,表明用RNA试剂盒改良法提取的总RNA可以用于后续分子实验。
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| 关 键 词： | RNA提取 杨树 侵染 树皮 |
An Efficient Method for Total RNA Extraction of Poplar Bark Infected with Pathogen and theApplication |
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| HOU Jia,SUN Feng-Shuo,WU Qiu-Ming,YANG Yu-Qiao,HE Wei,WANG Yan-Wei. An Efficient Method for Total RNA Extraction of Poplar Bark Infected with Pathogen and theApplication[J]. Plant Physiology Communications, 2014, 0(2): 223-228 |
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| Authors: | HOU Jia SUN Feng-Shuo WU Qiu-Ming YANG Yu-Qiao HE Wei WANG Yan-Wei |
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| Affiliation: | 1Key Laboratory for Silviculture and Conservation of Ministry of Education, 2National Engineering Laboratory for Tree Breeding, JKey Laboratory of Genetics and Breeding in Forest Trees and Ornamental Plants of Ministry of Education, 4Tree and Ornamental Plant Breeding and Biotechnology Laboratory of State Forestry Administration, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China,＂ Forestry Research Institute of Puyang, Puyang, Henan 457000, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNAextraction poplar infection bark |
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