不同异源启动子与MDV gB启动子及其复合启动子的活性比较

为了选择适宜的启动子调控外源基因的表达，以改善马立克氏病病毒为载体的重组病毒的免疫保护力。将hCMV立即早期启动子及增强子、SV40早晚期启动子及增强子或hCMV立即早期增强子的部分序列分别与马立克氏病病毒（MDV）自身的囊膜糖蛋白B基因（gB）启动子核心部分在体外杂合，分别构建复合启动子PhCMVgB、P SVgB或PengB；将这些启动子与虫荧光素酶报告基因相连，构建表达载体。利用脂质体将以上质粒与内标质粒（pSVβLacZ）共转染鸡胚成纤维次代细胞，于转染后48h，将细胞刮下来，利用荧光素酶测定试剂盒和β半乳糖苷酶测定试剂盒分别测定转染细胞的荧光素酶和β半乳糖苷酶的活性，通过荧光素酶和β半乳糖苷酶活性的比值获得虫荧光素酶的相对活性，利用虫荧光素酶的相对活性进行启动子的活性比较。结果表明，复合启动子相对马立克氏病病毒自身的gB启动子，活性有不同程度的提高，其中复合启动子PhCMVgB的活性最高，而复合启动子PSVgB和PengB的活性相当；但与商业强启动子相比，复合启动子活性要弱一些或相当。因此，从某种意义上讲，这些复合启动子既具有gB启动子的一些特性，又有商业强启动子的一些特性，为以马立克氏病毒为载体的新兴疫苗的开发奠定了基础。

Comparison of the relative luciferase activity in secondary CEF by different heterogenous strong promoters, MDV gB promoter and the composed promoters