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感染性猪圆环病毒2型基因组DNA的分子克隆
引用本文:芦银华,华修国,崔立,谈国蕾,许立华,黄伟坚,陈德胜,陈溥言. 感染性猪圆环病毒2型基因组DNA的分子克隆[J]. 中国病毒学, 2003, 18(4): 371-375
作者姓名:芦银华  华修国  崔立  谈国蕾  许立华  黄伟坚  陈德胜  陈溥言
作者单位:1. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京,210095
2. 上海交通大学农学院,上海,200030
3. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京,210095;宁夏大学农学院动物科学系,宁夏银川,750105
基金项目:国家863高技术发展计划资助项目(2001AA249012);上海市科技兴农攻关项目[农科攻字(2001)第3-5号]
摘    要:本研究通过PCR扩增出猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组(1 768bp),克隆入pcDNA3载体的EcoRI酶切应点,获得含有PCV-2全基因组的重组质粒,命名为pcDNApcv2.将重组质粒大量扩增后,用EcoRI切出1 768bp的PCV-2全基因组,在体外用T4 DNA连接酶使其连接环化.用脂质体法将体外连接产物转染无PCV污染的PK-15细胞,经4次连续传代,用间接免疫荧光实验(IFA)及电镜观察证实已获得复制能力的PCV-2病毒.由此可见,本试验构建的环化的PCV-2全基因组DNA具有感染性.

关 键 词:猪圆环病毒2型  基因组  转染
文章编号:1003-5125(2003)04-0371-05
修稿时间:2003-01-15

Molecular Cloning of the Infectious Genomic DNA of Porcine circovirus Type 2
LUYin—hua,HUA Xiu—guo,CUI Li,TAN Guo—lei,XU Li—hua ’,HUANG Wei-jian,CHEN De.sheng .CHEN Pu—yan. Molecular Cloning of the Infectious Genomic DNA of Porcine circovirus Type 2[J]. Virologica Sinica, 2003, 18(4): 371-375
Authors:LUYin—hua  HUA Xiu—guo  CUI Li  TAN Guo—lei  XU Li—hua ’  HUANG Wei-jian  CHEN De.sheng .CHEN Pu—yan
Affiliation:1.Key laboratory of Animal Disease Diagnostic and Immunology,Ministry of Agriculture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China2.Colle·. P ofAgriculture,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200030,China3.Anima l Science Department ofAgricultural College。Ningxia University,Hnchuan 750105,China
Abstract:
Keywords:Porcine circovirus type 2   Complete genome   Transfection
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