| 重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的高效表达与纯化 |
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| 引用本文： | 陈悦,李环,姚忠,韦萍.重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的高效表达与纯化[J].生物加工过程,2006,4(4):56-60. |
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| 作者姓名： | 陈悦 李环 姚忠 韦萍 |
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| 作者单位： | 南京工业大学,制药与生命科学学院,南京,210009 |
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| 基金项目： | 国家973项目基金资助(编号2003CB7160004) |
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| 摘 要： | 利用质粒pET-22b( )为表达载体,成功构建了高效表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的基因工程菌BL21-pET-22b( )-argE。研究了该菌的最适超声破壁条件及硫酸铵分级沉淀的最适范围,并以金属螯合亲和层析法纯化含有6-His-Tag的目的蛋白。结果表明:26℃诱导表达的菌体,最佳超声破碎条件为功率200 W,超声时间为15min;目的蛋白主要存在于40%~50%硫酸铵沉淀中。通过Ni-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白,可以达到SDS-PAGE电泳纯,并显示单亚基相对分子质量为43 000。纯化倍数为139倍,回收率为11.1%。
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| 关 键 词： | N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶 基因工程菌 亲和层析 纯化 |
| 文章编号： | 1672-3678（2006）04-0056-05 |
| 收稿时间： | 2006-08-03 |
| 修稿时间： | 2006年8月3日 |
The overexpression and purification of recombinant protein acetylornithine deacetylase |
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| CHEN Yue,LI Huan,YAO Zhong,WEI Ping.The overexpression and purification of recombinant protein acetylornithine deacetylase[J].Chinese Journal of Bioprocess Engineering,2006,4(4):56-60. |
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| Authors: | CHEN Yue LI Huan YAO Zhong WEI Ping |
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| Institution: | College of Life Science and Pharmaceutical, Nanjing University of Technology, Nanjing 210009, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | N-acetylornithine deacetylase genetic engineering strain affinity chromatography purification |
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