| 钝齿棒杆菌CD945丙酮酸羧化酶基因的克隆、序列分析及表达 |
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| 引用本文： | 王绛 刘阳剑 王宇 张英姿 余志华 丁久元. 钝齿棒杆菌CD945丙酮酸羧化酶基因的克隆、序列分析及表达[J]. 微生物学报, 2003, 43(2): 214-219 |
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| 作者姓名： | 王绛 刘阳剑 王宇 张英姿 余志华 丁久元 |
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| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所微生物生物技术中心,北京,100080 |
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| 基金项目： | 中国科学院重点项目的资助~~ |
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| 摘 要： | 以钝齿棒杆菌（Corynebacterium crenatum）突变株CD945的基因组为模板，运用PCR方法，扩增出丙酮酸羧化酶的基因片段。核苷酸序列分析结果表明，该片段全长3657bp，以GTG为起始密码子，编码一个ORF。该ORF的核酸序列与Corynebacterium glutamicum,Mycobacterium smegmatis以及Saccharomyces cerevisiae的丙酮酸羧化酶结构基因相比，相似性分别为98.22%、62.41%和49.61%。由ORF推导出的氨基酸序列与上述属种的丙酮酸羧化酶相比，同源性分别是99.30%、64.65%和44.04%。经证实对于酶的催化活性至关重要的一些保守区域，如ATP和生物素的结合位点等，在该氨基酸序列中都存在。将该基因片段转化钝齿棒杆菌（C. crenatum） CD945，利用CTAB处理细胞和苹果酸脱氢酶偶联测定相结合的方法，进行酶活力的分析，结果表明，重组子与供体菌相比，丙酮酸羧化酶的活力提高5倍。
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| 关 键 词： | 棒杆菌， 丙酮酸羧化酶， 氨基酸 |
| 文章编号： | 0001-6179(2003)02-0214-06 |
Cloning, Sequence Analysis and Expression of Pyruvate Carboxylase Gene in Corynebacterium crenatum CD945 |
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| Wang Jiang Liu Yangjian Wang Yu Zhang Yingzi Yu Zhihua Ding Jiuyuan. Cloning, Sequence Analysis and Expression of Pyruvate Carboxylase Gene in Corynebacterium crenatum CD945[J]. Acta microbiologica Sinica, 2003, 43(2): 214-219 |
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| Authors: | Wang Jiang Liu Yangjian Wang Yu Zhang Yingzi Yu Zhihua Ding Jiuyuan |
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| Affiliation: | Wang Jiang Liu Yangjian Wang Yu Zhang Yingzi Yu Zhihua Ding Jiuyuan ** |
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| Keywords: | Corynebacteria Pyruvate carboxylase Amino acids |
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