| 人HIF-1α miRNA干扰质粒的构建及其在Lovo细胞中有效性的检测 |
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| 引用本文： | 丁震宇,梁后杰.人HIF-1α miRNA干扰质粒的构建及其在Lovo细胞中有效性的检测[J].现代生物医学进展,2008,8(6):1028-1031. |
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| 作者姓名： | 丁震宇 梁后杰 |
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| 作者单位： | 第三军医大学西南医院肿瘤科,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的:构建人HIF-1α的miRNA特异性干扰表达载体并转染人结肠癌Lovo细胞检测其有效性.方法:设计合成针对人HIF-1α基因的特异性miRNA前体寡核苷酸,依次通过退火、连接,构建含HIF-1α前体miRNA的重组干扰质粒pcDNA?6.2-GW/EmGFP-HIF-1α-miR,并转染人结肠癌Lovo细胞,经半定量RT-PCR技术鉴定其干扰有效性.结果:经双酶切及测序鉴定,针对人HIF-1α基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制人结肠癌Lovo细胞中HIF-1α mRNA表达.结论:成功构建针时人HIF-1α基因的miRNA特异性有效干扰质粒,为后续HIF-1α基因慢病毒miRNA表达载体的构建及其在结肠癌多药耐药中的相关功能研究奠定基础.
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| 关 键 词： | 缺氧诱导因子-1α 微小RNA RNA干扰 结肠癌 Lovo细胞 miRNA 重组干扰质粒 Lovo 细胞 有效性 检测 Human Targeting Expression Vector RNAi Construction Cells Effect 功能研究 相关 多药耐药 结肠癌 表达载体的构建 病毒 mRNA |
| 文章编号： | 1673-6273(2008)06-1028-04 |
| 修稿时间： | 2008年2月2日 |
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