人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在Pichia pastoris中的表达 |
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引用本文: | 田昱,李平,朱运松.人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在Pichia pastoris中的表达[J].中国生物化学与分子生物学报,1998,14(3):258-263. |
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作者姓名: | 田昱 李平 朱运松 |
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作者单位: | 上海医科大学分子遗传学研究室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家教委博士点基金 |
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摘 要: | 用PCR方法从pPAIJ.7中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)基因,与pPUC18重组,经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析,获得全长人PAI-2基因.PAI-2基因与表达载体pPIC9重组,构建受乙醇氧化酶1基因(AOX1)启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化GS115宿主菌,经表型筛选和PCR扩增筛选阳性克隆,用甲醇诱导表达,重组PAI-2以分泌型表达,占分泌总蛋白的30%,具PAI-2抗原性,与低分子量尿激酶形成了抗SDS复合物,具抑制纤溶的活性(91.4AIU/ml).对培养条件也进行了探讨.
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关 键 词: | 纤溶酶原激活剂抑制物2型 酵母表达 |
收稿时间: | 1998-06-20 |
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