酵母双杂交筛选与蛋白激酶CK2α′相互作用蛋白——泛素-52氨基酸融合蛋白的鉴定 |
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作者姓名: | 陈碧 骆艳婷 刘新光 梁念慈 |
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作者单位: | 1)广东医学院生物化学与分子生物学研究所,湛江524023;2)广东医学院衰老研究所,东莞523808 |
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摘 要: | 蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶. 为研究CK2α′亚基在精子发生中的作用机制,将构建于pACT2质粒的人睾丸cDNA文库和人蛋白激酶CK2α′为诱饵蛋白进行酵母双杂交实验. 以初步筛选与人蛋白激酶CK2α′相互作用蛋白的阳性候选克隆,筛选获得8个阳性克隆,其中1个与人泛素-52氨基酸融合蛋白基因(UBA52)的cDNA序列有高度同源性(100%). GST pull-down实验在细胞外进一步证实了CK2α′与UBA52之间存在相互作用. 本实验证明,人泛素-52氨基酸(UBA52)融合蛋白是人CK2α′亚基的相互作用蛋白, 它们之间的相互作用对精子发生机制的影响尚不清楚,进一步分子机制研究正在进行中.
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关 键 词: | 人蛋白激酶CK2α′ 酵母双杂交系统 睾丸 人泛素-52氨基酸融合蛋白(UBA52) GSTpull-down |
收稿时间: | 2008-01-02 |
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