| 表皮葡萄球菌PhoU同源物(SERP0316)的抗体制备及免疫鉴定 |
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| 引用本文： | 韩海燕,王小飞,武有聪,许涛,刘华勇,蔡霞,瞿涤. 表皮葡萄球菌PhoU同源物(SERP0316)的抗体制备及免疫鉴定[J]. 微生物与感染, 2014, 9(3) |
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| 作者姓名： | 韩海燕 王小飞 武有聪 许涛 刘华勇 蔡霞 瞿涤 |
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| 作者单位： | 复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室,上海,200032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，“十二五”国家科技重大专项 |
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| 摘 要： | 表皮葡萄球菌可在植入性医疗材料表面形成生物膜,对多种抗生素耐受,而持留菌的形成是导致细菌生物膜耐药的原因之一。研究发现,大肠埃希菌中PhoU可影响持留菌的形成,与细菌对多种抗生素及压力条件的耐受相关,但表皮葡萄球菌中PhoU的功能仍不清楚。生物信息学分析显示,在表皮葡萄球菌中存在2个phoU同源基因,其中serp0956位于pst操纵子中,命名为phoU1;另一个编码功能未知蛋白的phoU基因同源物(serp0316)命名为phoU2。前期研究显示,敲除phoU1并不影响表皮葡萄球菌生长、生物膜形成等生物学特性,为此本研究对PhoU2进行了初步探讨。利用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测phoU2基因在表皮葡萄球菌SE1457不同生长时期的转录水平,发现其在细菌生长不同时间点持续表达,其中对数期(6h)表达量相对较高。为进一步研究表皮葡萄球菌中PhoU2的表达情况,对PhoU2蛋白进行原核表达和纯化,并用纯化的重组PhoU2蛋白免疫小鼠制备PhoU2多克隆抗体。在此基础上,利用蛋白免疫印迹法检测PhoU2在SE1457菌株不同生长时间点的表达水平,结果显示PhoU2在细菌生长对数期和平台期均有表达。另外,在不同的表皮葡萄球菌临床分离株中均检测到PhoU2蛋白表达,表明PhoU2具有一定的保守性。以上研究提示,PhoU2可能作为PhoU的功能同源物发挥一定的作用,为进一步研究表皮葡萄球菌PhoU2的生物学功能及其在生物膜和持留菌形成中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 表皮葡萄球菌 phoU同源基因 原核表达 持留菌 |
Expression of a PhoU homologue (SERP0316) in Staphylococcus epidermidis |
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| HAN Hai-Yan,WANG Xiao-Fei,WU You-Cong,XU Tao,LIU Hua-Yong,CAI Xia,QU Di. Expression of a PhoU homologue (SERP0316) in Staphylococcus epidermidis[J]. Journal of Microbes and Infection, 2014, 9(3) |
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| Authors: | HAN Hai-Yan WANG Xiao-Fei WU You-Cong XU Tao LIU Hua-Yong CAI Xia QU Di |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Staphylococcus epidermidis phoU homologue Prokaryotic expression Persister |
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