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盐穗木miR166a前体和预测靶基因ATHB8-like的克隆及二者靶向关系的鉴定
引用本文:张素伟,易小娅,曾幼玲. 盐穗木miR166a前体和预测靶基因ATHB8-like的克隆及二者靶向关系的鉴定[J]. 西北植物学报, 2017, 37(6): 1073-1079
作者姓名:张素伟  易小娅  曾幼玲
作者单位:(新疆大学 生命科学与技术学院,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐 830046)
基金项目:新疆自治区自然科学基金(2015211C274)
摘    要:以盐生植物盐穗木为实验材料,从前期构建的高盐胁迫下盐穗木根的小RNA文库中候选了差异表达的miR166a,利用生物信息学从盐穗木转录组数据中预测其靶基因;采用5′RLM-RACE技术鉴定盐穗木miR166a对预测靶基因ATHB8-like的靶向性;通过PCR和RACE技术克隆盐穗木miR166a前体和预测靶基因ATHB8-like全长基因序列,并进行相应的生物信息学分析。结果显示:盐穗木miR166a预测的靶基因为ATHB8-like;通过实验鉴定确实存在靶向切割,具体的切割位点位于miR166a成熟体的14~15碱基之间;miR166a成熟体序列在不同植物中高度保守;克隆获得的盐穗木miR166a前体可折叠成完整的颈环结构,符合miRNA的前体特征,候选植物miR166a前体在进化上没有表现出保守性;预测的靶基因ATHB8-like cDNA全长为2 786bp,开放阅读框为2 526bp,编码841个氨基酸,ATHB8-like具有一个HD-ZIPⅢ结构域,在进化上具有保守性。该研究结果为进一步开展盐穗木miR166a和ATHB8-like的生物学功能奠定了基础。

关 键 词:盐穗木;miR166a;ATHB8 like;靶向关系;克隆

Clone and Correlation Identification of Halostachys caspica miR166a Precursor and Its Predicted Target ATHB8 like
ZHANG Suwei,YI Xiaoy,ZENG Youling. Clone and Correlation Identification of Halostachys caspica miR166a Precursor and Its Predicted Target ATHB8 like[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2017, 37(6): 1073-1079
Authors:ZHANG Suwei  YI Xiaoy  ZENG Youling
Abstract:
Keywords:Halostachys caspica   miR166a   AHTB8 like   correlation   clone
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