凝血因子FXIII A链基因第1内含子内顺式调节元件的鉴定 |
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引用本文: | 黄丽君,李慧,刘晗,郭黎媛,高利波,刘新华,蔡望伟,李刚.凝血因子FXIII A链基因第1内含子内顺式调节元件的鉴定[J].中国生物化学与分子生物学报,2007,23(5):338-343. |
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作者姓名: | 黄丽君 李慧 刘晗 郭黎媛 高利波 刘新华 蔡望伟 李刚 |
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作者单位: | 1. 北京大学医学部生物化学与分子生物学系,北京,100083;海南医学院生化教研室,海口,570102 2. 北京大学医学部生物化学与分子生物学系,北京,100083 3. 海南医学院生化教研室,海口,570102 |
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基金项目: | 高等学校博士学科点专项科研项目;国家自然科学基金;教育部科学技术研究重点项目;海南医学院校科研和教改项目 |
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摘 要: | 探讨FⅩⅢ A基因表达的分子机制.凝胶阻滞实验(EMSA)结果证明,FⅩⅢ A基因第1内含子5′区的前12碱基与转录因子结合并由此调控基因表达.FⅩⅢ A基因第1内含子第12位碱基由C突变为A(内含子1 (+12)C→A)导致与转录因子结合能力降低.构建不同的荧光素酶表达质粒Luc 1、Luc 2、Luc 3、Luc 4、Luc 5、Luc 6,并转染U937细胞和HepG2细胞.结果显示,如果Luc 5(具有最高表达活性)的内含子1(+12)由C突变为A,启动子活性显著降低.与Luc 5相比,突变后的Luc 5的活性分别下降了52.9%(U937, P<0.01)和47.6%(HepG2, P<0.01).将Luc 5与PN3 Sp1共同转染U937细胞和HepG2细胞后,Luc 5的荧光素酶活性分别提高了42.4%(U937,与Luc 5单独转染比较P<0.01)和54.9%(HepG2, 与Luc 5单独转染比较P<0.01),而突变后的Luc 5(Mut)与PN3 Sp1共同转染则没有明显的改变.表明转录因子Sp1在FⅩⅢ A基因表达的重要性.这些结果也表明,内含子在FⅩⅢ A基因表达过程中起重要作用,为遗传性凝血因子发病机理的研究提供了新的证据.
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关 键 词: | 凝血因子(FXIII)内含子 点突变 表达调控 |
收稿时间: | 2006-9-29 |
修稿时间: | 2006年9月29日 |
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