| 重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ用pMAL-p2X载体的表达和纯化 |
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| 引用本文： | 刘君梁,刁建波,唐建洲,谢锦云,梁宋平.重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ用pMAL-p2X载体的表达和纯化[J].中国生物化学与分子生物学报,2005,21(1):39-44. |
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| 作者姓名： | 刘君梁 刁建波 唐建洲 谢锦云 梁宋平 |
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| 作者单位： | 1. 湖南师范大学生命科学学院,长沙,410081
2. 北京大学生命科学学院,蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京,100871 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (NO .3 0 170 193 )~~ |
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| 摘 要： | 虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ基因通过PCR扩增 ,插入pMAL p2X载体 ,基因 5′端插入凝血酶切割位点 .在大肠杆菌中经IPTG诱导高效分泌表达 .表达产物N端含麦芽糖结合蛋白 ,融合蛋白被分泌到大肠杆菌的胞间质 .经冷渗透休克后 ,透析脱盐 ,用凝血酶切割融合蛋白 ,再经SuperdexTM75分子筛柱层析、高效液相色谱反相C18柱纯化 ,得到重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ .质谱分析表明 ,rHWTX Ⅺ系正确表达产物 ,重组HWTX Ⅺ表现出与天然HWTX Ⅺ一致的生物学活性 .
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| 关 键 词： | 虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ pMAL-p2X 凝血酶 胰蛋白酶抑制剂 |
| 收稿时间： | 2005-02-20 |
| 修稿时间： | 2004年2月25日 |
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