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半乳糖凝集素-3结合蛋白作为正向调节因子参与IFN-γ介导的抗HBV作用
作者姓名:孟诗敏  陈忠伟  李涵泺  魏艳红  胡康洪
作者单位:湖北工业大学生物工程与食品学院中德生物医学中心 工业微生物湖北省重点实验室 国家外专局/教育部细胞调控与分子药物"111"引智基地 湖北 武汉 430068
基金项目:湖北工业大学高层次人才启动基金项目(337203)
摘    要:摘要 目的:研究半乳糖凝集素-3结合蛋白(LGALS3BP)在IFN-?酌介导的抗HBV中的作用。方法:采用qRT-PCR及Western Blot分别检测HepG2细胞瞬转过表达质粒及干扰质粒后LGALS3BP转录水平和翻译水平的变化及检测IFN-γ对HepG2细胞内源性LGALS3BP转录水平和翻译水平的影响;采用CCK-8评价LGALS3BP表达量的变化对HepG2细胞增殖的影响及确定IFN-γ处理HepG2和HepG2.215的最适浓度;采用ELISA检测当LGALSEBP表达量发生变化时,IFN-γ刺激后对细胞外分泌的HBsAg和HBeAg的影响;采用q-PCR和RT-PCR分别检测细胞内HBV核衣壳中DNA和细胞内HBV RNA水平。结果:40 ng/mL的IFN-γ处理HepG2细胞48小时,LGALS3BP mRNA表达量与对照组相比提高2.87倍,但LGALS3BP表达量的变化对细胞增殖无显著作用;当过表达LGALS3BP时,在IFN-γ介导的抗HBV过程中,与对照组相比,HepG2.215细胞分泌的HBsAg、HBeAg以及细胞内HBV DNA和RNA的相对下降幅度分别为46%、67%、59%、49%;与对照组相比,转染pCH9-3091的HepG2细胞分泌的HBsAg、HBeAg以及细胞内HBV DNA和RNA的相对下降幅度分别为67%、53%、60%、29%;而当干扰LGALS3BP时,在IFN-γ介导的抗HBV过程中,与对照组相比,HepG2.215细胞分泌的HBsAg、HBeAg以及细胞内HBV DNA和RNA的相对上升幅度分别为46%、67%、59%、49%;与对照组相比,转染pCH9-3091的HepG2细胞分泌的HBsAg、HBeAg以及细胞内HBV DNA和RNA的相对上升幅度分别为67%、77%、67%、45%。结论:LGALS3BP作为正向调节因子参与IFN-?酌介导的抗HBV过程。

关 键 词:乙型肝炎病毒  干扰素γ  半乳糖凝集素-3结合蛋白  增殖
收稿时间:2021-03-15
修稿时间:2021-04-13
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