| 前脑特异性CCKR-2双转基因小鼠的繁育及基因鉴定 |
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| 引用本文： | 凌 凤,阮思蓓,唐晓琴,李 昕,高子清,李 丽,唐亚平,罗 静,唐明希. 前脑特异性CCKR-2双转基因小鼠的繁育及基因鉴定[J]. 现代生物医学进展, 2021, 0(20): 3841-3844 |
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| 作者姓名： | 凌 凤 阮思蓓 唐晓琴 李 昕 高子清 李 丽 唐亚平 罗 静 唐明希 |
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| 作者单位： | 西南医科大学附属医院病理科 四川 泸州 646000;广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心 广东 广州 510000;西南医科大学神经生物研究室 四川 泸州 646000；广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心 广东 广州 510000 |
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| 基金项目： | 四川省科技厅科技支撑计划项目（14ZC0054）；西南医科大学-泸州市联合项目（2017LZXNYD-J14）；西南医科大学青年基金项目（2017-ZRQN-O74，2018-ZRQN-092)；西南医科大学附属医院项目（17153） |
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| 摘 要： | 摘要 目的：繁殖及鉴定可调控前脑特异性胆囊收缩素受体2（Cholecystokinin receptor-2,CCKR-2）双转基因小鼠（tTA/tetO- CCKR-2 double transgenic，简称dtg），为进一步研究CCKR-2在焦虑相关疾病，如焦虑症、恐惧行为、创伤后应激障碍等发病过程中的作用及分子机制提供实验模型。方法：（1）利用α-CaMKII/tTA单转基因小鼠与tetO/CCKR-2单转基因小鼠杂交，所得子代尽可能远亲繁殖获得dtg小鼠，提取子代鼠尾基因组DNA，采用PCR法及琼脂糖凝胶电泳法鉴定PCR产物以确定其基因型；（2）采用原位杂交方法验证CCKR-2双转基因前脑特异性表达，筛选CCKR-2双转基因型及前脑特异性表达者作为继代种鼠和实验用鼠。结果：（1）PCR凝胶电泳图显示清晰的tTA（350 bp）和CCKR-2（550 bp）条带，野生型无条带显示，表明琼脂糖凝胶电泳结果与dtg模型预期基因片段大小相符；（2）原位杂交结果显示dtg小鼠前脑区域有强烈的CCKR-2表达而野生型小鼠不明显。此结果表明dtg双转基因小鼠在本实验室的成功建立与繁殖及继代，同时繁殖出更多的dtg小鼠。结论：通过正确的饲养繁育和基因鉴定方法能成功获得dtg双转基因小鼠，为本实验室进行后续相关研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | CCKR-2；转基因小鼠；聚合酶链反应；琼脂糖凝胶电泳；原位杂交 |
| 收稿时间： | 2020-11-27 |
| 修稿时间： | 2020-12-23 |
Breeding and Identification of CCKR-2 Double Transgenic Mice |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CCKR-2 Transgenic mice Polymerase chain reaction Agarose gel electrophoresis In situ hybridization |
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