牙龈卟啉单胞菌脂多糖通过TXNIP/Nlrp3炎性通路对小鼠牙周膜成纤维细胞迁移的影响

摘要 目的：研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Porphyromonas lipopolysaccharide，LPS-PG）对牙周膜成纤维细胞（mouse periodontal Ligament: Normal Fibroblasts，mPDLFs）增殖及迁移的影响，探讨TXNIP/Nlrp3炎性体途径在其中的作用。方法：采用不同浓度的LPS-PG刺激小鼠mPDLFs细胞不同时间，CCK-8法检测细胞增殖抑制率。然后将细胞分为对照组（培养基作用24 h）和LPS-PG组（2 M的LPS-PG作用24 h），划痕实验检测细胞迁移，ELISA法检测白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）和高迁移率族蛋白B1（High mobility group protein B1，HMGB1）的水平，Western Blot检测Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor pyrin domain3，NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（Apoptosis-associated speck-like protein，ASC）、活化半胱氨酸蛋白酶（cleaved-caspase-1）和硫氧还蛋白相互作用蛋白（Thioredoxin-interacting protein,TXNIP）的表达，免疫共沉淀检测以上蛋白间的相互作用。结果：与0 M的LPS-PG相比，1 M和2 M的LPS-PG可显著增加mPDLFs的细胞增殖抑制率（P<0.05）。与LPS-PG作用0 h相比，LPS-PG作用12 h、24 h和48 h均可显著增加mPDLFs的细胞增殖抑制率（P<0.05）。LPS-PG组细胞向中间''伤口''迁移的距离及细胞数量远远低于对照组。与对照组相比，LPS-PG组细胞中IL-1β和HMGB1的水平、NLRP3、cleaved-caspase-1和TXNIP蛋白表达均显著增加，且NLRP3和ASC、NLRP3和cleaved-caspase-1、TXNIP和NLRP3的蛋白互作能力显著增强（P<0.05），而两组ASC蛋白的表达无显著差异（P＞0.05）。结论：LPS-PG可抑制mPDLFs细胞的增殖和迁移，其机制与Nlrp3炎性体的形成与活化有密切的关系。

Effect of Porphyromonas Gingivalis Lipopolysaccharide on Migration of Periodontal Ligament Fibroblasts ViaTXNIP/Nlrp3 Inflammasome Pathway