| β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因在大肠杆菌中共表达 |
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| 作者姓名： | 高海有 刘正初 段盛文 成莉凤 石岩 冯湘沅 郑霞 郑科 宋志姣 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院麻类研究所 湖南 长沙 410205;2. Central South University School of Metallurgical Science and Engineering, Changsha, Hunan 410083, China;1. 中国农业科学院麻类研究所 湖南 长沙 410205;3. 广西大学 林学院 广西 南宁 530004 |
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| 基金项目： | 国家麻类产业技术体系建设专项(No. nycytx-19-E21); 湖南省自然科学基金项目(No. 11JJ4021) |
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| 摘 要： | 【目的】β-甘露聚糖酶和木聚糖酶都属于半纤维素酶,它们已经同时运用于工农业生产的许多领域。构建β-甘露聚糖酶和木聚糖酶共表达菌株并进行相关评价。【方法】通过设计一个共同的酶切位点,将菌株Bacillus subtilis BE-91中的β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因串联到表达载体pET28a(+)上,转化大肠杆菌构建了一株能够共表达β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的菌株B.pET28a-man-xyl。【结果】菌株诱导21 h后,发酵液中β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的酶活分别为713.34 U/mL和1455.83 U/mL,是胞内酶活的11.8倍和2.53倍。【结论】SDS-PAGE分析、水解圈活性检测和胞外酶与胞内酶酶活检测表明:两个酶均以功能蛋白独立分泌到胞外。此外,与β-甘露聚糖酶和木聚糖酶单独酶解半纤维素相比,复合酶的酶解效果更好。菌株的成功构建为复合酶制剂(半纤维素酶制剂)的研究和生产奠定基础。
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| 关 键 词： | β-甘露聚糖酶 木聚糖酶 大肠杆菌 共表达 |
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