HIF-1α/BNIP3信号通路对BCG诱导巨噬细胞自噬的影响

【背景】缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1-alpha，HIF-1α)是响应细胞低氧反应的关键因子，在红细胞生成、血管形成、能量代谢及调节宿主免疫代谢中发挥着重要作用。【目的】探讨HIF-1α/Bcl-2-腺病毒E1B相互作用蛋白3(Bcl-2-adenovirus E1B 19-kDa interacting protein 3，BNIP3)信号通路对牛分枝杆菌卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin，BCG)诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7自噬的影响。【方法】构建HIF-1α的小干扰RNA (siHIF-1α)，转染RAW 264.7细胞后，结合BCG感染，采用流式细胞仪检测细胞自噬率，用Western blotting或免疫荧光技术检测HIF-1α、BNIP3、LC3、Beclin 1、Rheb和mTOR的表达水平。【结果】BCG感染显著上调巨噬细胞中LC3和HIF-1α的表达，用siHIF-1α结合BCG感染后显著下调巨噬细胞中HIF-1α、BNIP3、LC3、Beclin 1和细胞自噬率水平，并促进Rheb和p-mTOR的表达。【结论】在BCG感染RAW 264.7细胞过程中，干扰HIF-1α表达抑制了HIF-1α/BNIP3信号通路，进而激活了mTOR途径，抑制BCG感染诱导的细胞自噬。