| 新城疫病毒7793 HN蛋白在昆虫SF9细胞中的表达研究 |
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| 引用本文： | 林宇宁,张磊,梁莹,樊晓晖.新城疫病毒7793 HN蛋白在昆虫SF9细胞中的表达研究[J].基因组学与应用生物学,2020,39(1):109-115. |
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| 作者姓名： | 林宇宁 张磊 梁莹 樊晓晖 |
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| 作者单位： | 广西医科大学微生物学教研室,南宁,530000;广西医科大学微生物学教研室,南宁,530000;广西医科大学微生物学教研室,南宁,530000;广西医科大学微生物学教研室,南宁,530000 |
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| 基金项目： | 本研究由2015～2018年国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 本实验对新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV) 7793 HN蛋白在杆状病毒表达系统中表达进行研究。提取病毒RNA并将其逆转录成cDNA,经PCR同义点突变在HN基因片段中加入NcoⅠ/XhoⅠ酶切位点,通过该酶切位点将HN基因克隆至穿梭载体p FastBac1质粒以构建重组质粒pFastBac1HTB-HN,然后用脂质体转染pFastBac1HTB-HN杆粒至昆虫SF9细胞。28℃无菌培养含pFastBac1HTB-HN杆粒的SF9细胞48 h,收集细胞培养上清液中的第一代病毒,感染SF9细胞,置28℃无菌培养60 h,收集细胞培养上清液,离心去除细胞碎片,取上清液中的第二代病毒,继续感染SF9细胞,置28℃无菌培养72 h,收集SF9细胞,用SDSPAGE和Western blotting验证HN蛋白的表达。SDS-PAGE和Western blotting均显示HN杆粒感染的SF9细胞成功表达了HN蛋白。本研究结果为进一步研究NDV7793-HN蛋白的抗肿瘤作用提供可靠试验依据。
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| 关 键 词： | 新城疫病毒(NDV) 杆状病毒表达系统 血凝素神经氨酸酶(HN) |
Expression of Newcastle Disease Virus Strain 7793 HN Protein in SF9 Cells |
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| Lin Yuning,Zhang Lei,Liang Ying,Fan Xiaohui.Expression of Newcastle Disease Virus Strain 7793 HN Protein in SF9 Cells[J].Genomics and Applied Biology,2020,39(1):109-115. |
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| Authors: | Lin Yuning Zhang Lei Liang Ying Fan Xiaohui |
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| Institution: | (Department of Microbiology,Guangxi Medical University,Nanning,530000) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Newcasle disease virus Bac-to-Bac baculovirus expression system Haemagglutinin-neuraminidase |
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