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SSCP技术分析活性污泥微生物群落结构的条件优化及检验
引用本文:王爱杰,阚洪晶,于振国,任南琪,刘春爽,张运晴,赵阳国.SSCP技术分析活性污泥微生物群落结构的条件优化及检验[J].微生物学通报,2008,35(7):1164-1169.
作者姓名:王爱杰  阚洪晶  于振国  任南琪  刘春爽  张运晴  赵阳国
作者单位:哈尔滨工业大学市政环境工程学院,哈尔滨,150090
基金项目:国家自然科学基金 , 教育部跨世纪优秀人才培养计划
摘    要:单链构象多态性(SSCP)技术是一种分析环境微生物遗传多态性的有效方法,具有快速、简便、灵敏等特点.但是,该技术用于分析复杂环境微生物群落结构时需要有针对性地优化操作条件.本研究针对聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)胶浓度、上样缓冲液中去离子甲酰胺浓度、电泳温度,电泳时间等确定了PCR-SSCP技术的优化条件,并以自养脱硫反硝化反应器启动期的活性污泥样品对此优化条件进行了检验,证明了16S rDNA V1~V3区为靶对象时,丙烯酰胺与甲叉的质量比49:1,质量分数12%的聚丙烯酰胺凝胶,上样缓冲液中去离子甲酰胺的体积分数1/3,在4℃,300 V,电泳18 h是最优的操作条件,可以获较理想的SSCP图谱.

关 键 词:单链构象多态性  条件优化  检验  微生物群落  SSCP  技术分析  活性污泥  污泥微生物  群落结构  条件优化  检验  Activated  Sludge  Analysis  Technology  Polymorphism  Conformation  Validation  Conditions  图谱  操作条件  最优  电泳时间  体积分数  凝胶

Optimal Conditions and Validation of Single-strand Conformation Polymorphism Technology for the Analysis of Microbial Communities in Activated Sludge
WANG Ai-Jie,KAN Hong-Jing,YU Zhen-Guo,REN Nan-Qi,LIU Chun-Shuang,ZHANG Yun-Qing and ZHAO Yang-Guo.Optimal Conditions and Validation of Single-strand Conformation Polymorphism Technology for the Analysis of Microbial Communities in Activated Sludge[J].Microbiology,2008,35(7):1164-1169.
Authors:WANG Ai-Jie  KAN Hong-Jing  YU Zhen-Guo  REN Nan-Qi  LIU Chun-Shuang  ZHANG Yun-Qing and ZHAO Yang-Guo
Institution:School of Environmental and Municipal Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090;School of Environmental and Municipal Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090;School of Environmental and Municipal Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090;School of Environmental and Municipal Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090;School of Environmental and Municipal Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090;School of Environmental and Municipal Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090;School of Environmental and Municipal Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090
Abstract:
Keywords:Single-strand conformation polymorphism  Optimal conditions  Validation  Microbial community
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