| 一种适用于产朊假丝酵母的基因敲除系统及其在gsh1基因敲除中的应用 |
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| 引用本文： | 张君丽,卫功元,董红军,朱泰承,李寅.一种适用于产朊假丝酵母的基因敲除系统及其在gsh1基因敲除中的应用[J].微生物学通报,2011,38(6):795-802. |
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| 作者姓名： | 张君丽 卫功元 董红军 朱泰承 李寅 |
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| 作者单位： | 1. 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123
2. 中国科学院微生物研究所,北京,100101 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No. 20906065); 江苏省属高校自然科学研究项目(No. 09KJB530009) |
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| 摘 要： | 报道一种适用于产朊假丝酵母Candida utilis的基因敲除系统,利用该敲除系统获得gsh1基因敲除杂合突变株。根据不同种属酵母菌γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)蛋白质的保守序列,克隆C.utilis SZU 07-01的gsh1基因;以商品化质粒pPICZalpha A为基础,构建gsh1基因的敲除载体pPICZalpha A-kan 3,其中,kan基因的启动子TEF被替换为来自于C.utilis SZU 07-01的GAP启动子(pGAP:kan)。质粒电转化C.utilis,获得gsh1基因敲除杂合突变株C.utilis GSH-6。结合发酵培养得到的数据进行分析,突变株的γ-GCS酶活比出发菌株降低17.5%,GSH合成量降低61%,细胞干重降低18.5%。所构建敲除组件pGAP:kan的成功应用为从分子水平研究C.utilis中谷胱甘肽(GSH)的生理功能提供了一种新借鉴。
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| 关 键 词： | 基因敲除 gsh1基因 产朊假丝酵母 谷胱甘肽 γ-GCS酶活 |
A new knocking-out system in Candida utilis and its application on disrupting the gsh1 gene |
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| ZHANG Jun-Li,WEI Gong-Yuan,DONG Hong-Jun,ZHU Tai-Cheng and LI Yin.A new knocking-out system in Candida utilis and its application on disrupting the gsh1 gene[J].Microbiology,2011,38(6):795-802. |
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| Authors: | ZHANG Jun-Li WEI Gong-Yuan DONG Hong-Jun ZHU Tai-Cheng and LI Yin |
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| Institution: | 1. School of Basic Medicine and Biological Science, College of Medicine, Soochow University, Suzhou, Jiangsu 215123, China;1. School of Basic Medicine and Biological Science, College of Medicine, Soochow University, Suzhou, Jiangsu 215123, China;2. Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;2. Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;2. Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene knockout gsh1 gene Candida utilis Glutathione γ-GCS activity |
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