痢疾志贺氏I型菌毒素基因的克隆与表达

从痢疾志贺氏l型菌W 30 864株中提取染色体DNA，用EcoRI完全酶解，电泳回收3—7 kb的片段，与载体pUC1 9质粒连接重组，用大肠阡菌痢疾样毒素(SLT）基因探针进行筛选，得到了阳性重组子。实验表明志贺氏毒素基因是位于约4.5kb的EcoR1片段上，包含毒素的A亚单位基因和B亚单位基因。在对克隆株的毒性测定中，乘用Hela—S3细胞试验，证明所产生的痢疾毒素县有杀死细胞的能力。此毒素可引起肠积水和充血，可使小鼠肢体麻痹并致死，克隆重组株的痢疾毒素产量是亲本野生株W30 864的16涪。此外，实验中还对克隆株和产生SLT的菌株的毒素产量做了比较。