EERα基因敲除小鼠的繁育及子代小鼠基因型的鉴定 |
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作者姓名: | 王强 钱文溢 刘景丽 朱勤 程洁 王宇 丁海霞 肖杭 |
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作者单位: | 1. 南京医科大学公共卫生学院神经毒理研究室,南京,210029 2. 南京医科大学公共卫生学院神经毒理研究室,南京,210029;江苏省医药动物实验基地,南京,210029 3. 江苏省医药动物实验基地,南京,210029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目,江苏省高校自然科学研究项目,江苏省普通高校研究生科研创新计划项目 |
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摘 要: | 目的 探讨雌激素受体α(ERα)基因敲除小鼠的优化繁育方法及ERα基因敲除小鼠子代鼠的鉴定方法,建立ERα基因敲除小鼠模型,为进一步研究ERα蛋白的功能奠定基础.方法 用4种不同的交配方式观察子代鼠的各表型比率及雌、雄性ERα基因突变纯合子小鼠的繁殖能力;从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,用PCR方法扩增ERα基因片段,琼脂糖凝胶电泳后观察结果.HE染色观察雌、雄性ERα<'-/->小鼠生殖系统表型变化.结果 WT、ERα<'+/->、ERα<'-/->各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌、雄性ERα<'-/->小鼠无繁殖能力.与WT比较,雄性ERα<'-/->小鼠睾丸脏器系数降低,睾丸病理变化表现为生精小管管腔膨胀,生精细胞层变薄,且排列不规则;雌性ERα<'-/->小鼠子宫脏器系数降低,子宫和卵巢病变明显,表现为:子宫浆膜、肌层、内膜层细胞排列不规则,卵巢有囊性病变、充血,无黄体.结论 雌、雄性ERα<'+/->小鼠交配是繁育ERα<'-/->小鼠的较好方法;实验所用PCR方法能够精确鉴定ERα<'-/->小鼠,ERα<'-/->小鼠的获得为ERα蛋白功能的实验研究提供了较理想的动物模型.
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关 键 词: | 雌激素受体α 基因敲除小鼠 基因型 |
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