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一株草鱼呼肠孤病毒弱毒株的分离、鉴定及免疫原性初步分析
引用本文:曾伟伟,王庆,刘永奎,张乐生,刘宝芹,石存斌,吴淑勤.一株草鱼呼肠孤病毒弱毒株的分离、鉴定及免疫原性初步分析[J].水生生物学报,2011,35(5):790-795.
作者姓名:曾伟伟  王庆  刘永奎  张乐生  刘宝芹  石存斌  吴淑勤
作者单位:1. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州,510380
2. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州510380;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306
基金项目:“引进国际先进农业科学技术计划”渔用弱毒疫苗安全评价及小瓜虫抗原表达等技术体系的引进[2008-G4(3)]; 农业科技跨越计划“草鱼出血病活疫苗及海水鱼弧菌病二联疫苗产业化生产与应用示范”资助
摘    要:从江西南昌患出血病草鱼体内分离出的草鱼病毒(暂命名为JX09-01)能使草鱼肾脏细胞(CIK)、草鱼肝细胞(L8824)、草鱼吻端成纤维细胞(PSF)产生明显的细胞病变效应(CPE)。感染CIK 细胞固定后经电镜观察,发现细胞质内有大量病毒聚集, 形态和排列方式与已报道的草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus, GCRV)相似。针对GCRV 873 株S6 基因设计的简并引物可以从病料组织和感染细胞中扩增出目的条带, 而针对GCRVHZ08 株S6 基因设计特异性引物未能扩增出目的条带。对JX09-01 株的S6 全基因进行序列分析表明, 其核苷酸序列同GCRV 873 株和HZ08 株的同源性分别是99.3%和30.4%, 推导出的氨基酸序列同源性分别是98.6%和30%, 说明草鱼病毒JX09-01 株为草鱼呼肠孤病毒。用JX09-01 株接种当年8-10 cm左右的草鱼, 没有明显的临床症状, 不能致草鱼死亡。用传代至15 代的CIK 细胞病毒液进行免疫保护试验, 结果显示其对强毒株的免疫保护率达到86.7%。实验结果初步显示, 新分离到的JX09-01 为草鱼呼肠孤病毒弱毒株, 可作为弱毒疫苗的候选毒株。  

关 键 词:草鱼呼肠孤病毒    分离    鉴定    序列分析    免疫原性  

ISOLATION AND IDENTIFICATION OF NEW GCRV STRAIN AND PRIMARY STUDY ON ITS IMMUNOGENICITY
ZENG Wei-Wei,WANG Qing,LIU Yong-Kui,ZHANG Le-Sheng,LIU Bao-Qin,SHI Cun-Bin,WU Shu-Qin.ISOLATION AND IDENTIFICATION OF NEW GCRV STRAIN AND PRIMARY STUDY ON ITS IMMUNOGENICITY[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2011,35(5):790-795.
Authors:ZENG Wei-Wei  WANG Qing  LIU Yong-Kui  ZHANG Le-Sheng  LIU Bao-Qin  SHI Cun-Bin  WU Shu-Qin
Institution:ZENG Wei-Wei1,WANG Qing1,LIU Yong-Kui1,2,ZHANG Le-Sheng1,LIU Bao-Qin1,SHI Cun-Bin1 and WU Shu-Qin1(1.Pearl River Fishery Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Guangzhou 510380,China,2.College of Fisheries and Life Science,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China)
Abstract:A new grass carp virus,assigned JX09-01,was isolated from a diseased grass carp case during routine ex-amination in Nanchang City,Jiangxi Province.The obvious cytopathic effects(CPE) were observed after the new iso-late inoculated in grass carp kidney cell(CIK),grass carp liver cell(L8824) and proboscis fibroblast cell(PSF) respec-tively,and plenty of non-enveloped virus particles with hexagonal shape were observed under electron microscope(EM),which was highly similar to reported grass carp reovirus(GCRV)....
Keywords:GCRV  Isolation  Identification  Sequence analysis  Immunogenicity  
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