| 渗透胁迫下脱水蛋白DHN1在猕猴桃细胞中表达及亚细胞分布的动态变化 |
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| 引用本文： | 邱全胜,王泽宙,蔡起贵,姜荣锡.渗透胁迫下脱水蛋白DHN1在猕猴桃细胞中表达及亚细胞分布的动态变化[J].中国科学C辑,2001,31(6):505-512. |
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| 作者姓名： | 邱全胜 王泽宙 蔡起贵 姜荣锡 |
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| 作者单位： | 1. 北京师范大学生命科学学院,北京,100875
2. 中国科学院植物研究所,北京,100093 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(批准号：39770077)、国家重点基础研究发展规划(批准号：G1999011705)和教育部重点科技(批准号：99133)资助项目 |
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| 摘 要： | 以绿色荧光蛋白(GFP)为报告分子, 通过构建DHN1-mGFP4融合蛋白表达载体, 研究了渗透胁迫条件下脱水蛋白DHN1的表达及其亚细胞分布的动态变化. 采用PCR方法在脱水蛋白基因dhn1两端引入XbaⅠ和BamHⅠ限制性内切酶位点, 克隆到质粒pBIN-35S mGFP4, 构建DHN1-mGFP4融合蛋白表达载体, 并采用基因枪转化猕猴桃(A. delicisoa)悬浮细胞. 培养10 h后观察到高效表达的GFP绿色荧光, 绿色荧光只出现在细胞核内. 提高培养介质渗透势后, 可以诱导脱水蛋白向细胞质分布(主要集中在质膜周围), 并且增加介质渗透势可以明显缩短细胞质出现绿色荧光的时间. 蛋白合成抑制剂环己亚胺能够抑制细胞质绿色荧光的出现, 暗示细胞质出现的脱水蛋白是诱导产生的结果. ABA可以明显促进细胞质绿色荧光的出现, 并且随着介质渗透势的升高迅速缩短细胞质绿色荧光的出现时间.
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| 关 键 词： | 渗透胁迫 脱水蛋白DHN1 绿色荧光蛋白(GFP) 瞬时表达亚细胞分布 ABA 猕猴桃悬浮细胞 |
| 收稿时间： | 2000-09-20 |
| 修稿时间： | 2000年9月20日 |
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