Ensembles of endothelial and mural cells promote angiogenesis in prenatal human brain

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Reduction of protein disulfide isomerase results in open conformations and stimulates dynamic exchange between structural ensembles

Human protein disulfide isomerase (PDI) is an essential redox-regulated enzyme required for oxidative protein folding. It comprises four thioredoxin domains, two catalytically active (a, a’) and two inactive (b, b’), organized to form a flexible abb’a’ U-shape. Snapshots of unbound oxidized and reduced PDI have been obtained by X-ray crystallography. Yet, how PDI’s structure changes in response to the redox environment and inhibitor binding remains controversial. Here, we used multiparameter confocal single-molecule FRET to track the movements of the two catalytic domains with high temporal resolution. We found that at equilibrium, PDI visits three structurally distinct conformational ensembles, two “open” (O₁ and O₂) and one “closed” (C). We show that the redox environment dictates the time spent in each ensemble and the rate at which they exchange. While oxidized PDI samples O₁, O₂, and C more evenly and in a slower fashion, reduced PDI predominantly populates O₁ and O₂ and exchanges between them more rapidly, on the submillisecond timescale. These findings were not expected based on crystallographic data. Using mutational analyses, we further demonstrate that the R300-W396 cation-π interaction and active site cysteines dictate, in unexpected ways, how the catalytic domains relocate. Finally, we show that irreversible inhibitors targeting the active sites of reduced PDI did not abolish these protein dynamics but rather shifted the equilibrium toward the closed ensemble. This work introduces a new structural framework that challenges current views of PDI dynamics, helps rationalize its multifaceted role in biology, and should be considered when designing PDI-targeted therapeutics.     

重组水蛭素的抗血栓形成作用及其机制

目的：研究重组水蛭素抗血栓形成的作用及机制。方法：将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、阿司匹林组和重组水蛭素低、中、高剂量组（n=10）。除对照组外,其余各组小鼠分别腹腔注射角叉菜胶2.5 mg/kg,诱发小鼠尾部血栓形成。注射角叉菜胶前24 h、0.5 h和注射后24 h,阿司匹林组小鼠分别腹腔注射阿司匹林25 mg/kg,重组水蛭素低、中、高剂量组小鼠分别腹腔注射0.05、0.1、0.2 mg/kg重组水蛭素,对照组和模型组小鼠分别腹腔注射等体积生理盐水。注射角叉菜胶后48 h,观察小鼠黑尾长度并计算黑尾发生率;检测血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）、6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）、血栓恶烷B2（TXB2）水平。结果：与对照组比较,模型组小鼠尾部形成血栓;血浆PT明显缩短（P<0.01）,PAI-1、TXB2水平明显升高（P<0.01）,t-PA、6-keto-PGF1α水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,重组水蛭素低、中、高剂量组和阿司匹林组小鼠尾部血栓长度明显缩短（P<0.05或P<0.01）,PT明显延长（P<0.01）,PAI-1、TXB2水平明显降低（P<0.01）,t-PA、6-keto-PGF1α水平明显升高（P<0.01）。与阿司匹林组比较,重组水蛭素低剂量组小鼠尾部血栓长度明显增加（P<0.05）,PT明显缩短（P<0.01）,PAI-1、TXB2水平明显升高（P<0.01）;重组水蛭素低、中剂量组6-keto-PGF1α水平明显降低（P<0.01,P<0.05）;重组水蛭素中剂量组PAI-1、TXB2水平明显升高（P<0.01,P<0.05）。结论：重组水蛭素有明显抗血栓形成作用,其机制可能与影响外源性凝血系统、促进纤溶功能有关。     

CT诊断用于胰腺癌侵犯胰周动静脉的临床价值分析

目的：探究CT诊断对于胰腺癌侵犯胰周动静脉的临床价值。方法：随机选取在我院就诊的64例胰腺癌患者,在他们进行手术前全在距离肿瘤边缘1cm内的血管进行分期和诊断进而进行螺旋CT检查。结果：经组织学术后病理切片染色发现胰周动脉29条,静脉48条。运用外科手术探查方法发现86条胰周动脉,89条胰周静脉。在这些血管中,有23条动脉、47条静脉经外科手术证实的确是肿瘤侵犯,并且经过CT诊断,我们最终断定为有25条动脉、46条静脉处于1～4级。结论：胰周动、静脉受到侵犯时,具有不同的CT表现特征,因此在利用CT方法判断胰周动、静脉遭受侵犯时应当根据不同情况不同对待。     

叶下珠有效部位对血栓形成的影响及其作用机制初探

采用Born方法和改良的Hamburger方法分别测定叶下珠 (Phyllanthusurinaria)含corilagin的有效部位 (代号PUW )在体内外对血小板聚集功能和对血小板与中性粒细胞之间粘附反应的影响 ;应用Myers方法评价PUW灌胃对小鼠尾静脉注射花生四烯酸 (AA)引起猝死的保护作用 ;运用改良的Charl ton方法及陈长勋等方法分别观察PUW灌胃对电刺激大鼠颈动脉血栓形成和下腔静脉血栓形成的影响 ;采用Tomihisa方法 ,观察PUW对大鼠尾尖出血时间的影响。结果显示 ,PUW在体内外对ADP、AA或血小板活化因子 (PAF)诱导的血小板聚集均无明显抑制作用 ;PUW呈浓度依赖性明显阻抑AA激活的血小板与中性粒细胞之间的粘附反应 ,其半数抑制浓度 (IC50 )为 39 7mg/kg。PUW (10、2 0和 4 0mg/kg)灌胃呈剂量依赖性显著减少AA致小鼠死亡的数量 ,明显延长电刺激大鼠颈动脉血栓形成时间 ,减轻大鼠下腔静脉血栓的干、湿重。 2 0mg/kg的PUW对出血时间无明显影响 ,4 0mg/kg的PUW虽延长出血时间 ,但与阿司匹林 (2 0mg/kg)比较 ,出血时间明显缩短 (P <0 0 5 )。本实验结果提示 ,PUW灌胃在多种体内血栓模型中均具有明显的抗血栓形成作用 ,其机制可能与阻抑血小板和中性粒细胞之间的的粘附作用密切相关。     

加味八珍汤联合PFNA术治疗老年股骨转子间骨折患者的临床效果及对血液流变学指标的影响

目的:研究加味八珍汤联合股骨近端防旋髓内钉(Proximal Femoral Nail Antirotation,PFNA)对老年股骨转子间骨折患者的临床效果及对术后隐性失血和血液流变学的影响。方法:选择2014年3月至2017年3月我院收治的68例接受PFNA治疗的转子间骨折者,将其随机平均分为观察组(34例,术后口服加味八珍汤颗粒7天)、对照组(34例)。对比两组总失血量、隐性失血量、隐性失血比例、血液流变学指标(血浆粘度及全血黏度低、中、高切)、不良反应等。结果:⑴两组各剔除2例,94.12%(64/68)的受试者完成研究。⑵两组总失血量相当,差异无统计学意义(P0.05);与对照组相比,观察组隐性失血量及隐性失血发生率均显著降低(P0.05)。⑶治疗前,两组血浆粘度及低、中、高切全血黏度比较差异无统计学意义(P0.05);治疗后,两组血浆粘度及低、中、高切全血黏度均显著低于本组治疗前(P0.05),且观察组以上指标均明显低于对照组(P0.05)。⑷观察组发生肌间静脉血栓1例,无药物过敏及毒副反应;对照组发生1例深静脉血栓、4例肌间静脉血栓。观察组不良反应率为3.125%,显著低于对照组(15.625%,P0.05)。结论:加味八珍汤既可显著减少老年股骨转子间骨折患者PFNA术后隐性失血,又能改善血流动力学、减少并发症。     

Discovery of novel (6S/12aS)-heptachpyridone capable of inhibiting thrombosis in vivo

The in vitro conversion of (1S,3S)-1-dimethoxylethyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid, (1S,3S)-DCCA, in rat plasma is monitored by HPLC-FT-ICR-MS. We show that the in vitro conversion of (1S,3S)-DCCA in rat plasma for 1 h leads to forming (6S/12aS)-bisdimethoxyethylheptachpyridone, reflecting intermolecular condensation of (1S,3S)-DCCA, and the in vitro conversion of (6S/12aS)-bisdimethoxyethylheptachpyridone in rat plasma for 1 h leads to forming (6S/12aS)-heptachpyridone, reflecting hydrolysis of (6S/12aS)-bisdimethoxyethylheptachpyridone. At a dose of 1.0 μmol/kg (6S/12aS)-heptachpyridone orally inhibits venous thrombosis and arterial thrombosis in vivo. Bleeding time, clotting time and international normalized ratio show that at this dose (6S/12aS)-heptachpyridone has no bleeding risk, does not lengthen clotting time and does not change the exogenous coagulation pathway. We also show that the reactions promoted by rat plasma are easy to practice by chemical synthesis. Thus our findings build a bridge across the in vivo conversion and the application.     

人体动脉血气波浪式变化特点的实验证据—同时间动、静脉血波浪式变化幅度的不同*

目的: 人动脉血来源是右心系统并在肺脏进行气体交换的静脉血,右心系统的静脉血是否存在波浪式信号目前尚没有证据支持,本研究旨在对比同时间动、静脉血中信号的连续变化特点。方法: 选择心功能正常,需要连续监测动脉血流动力学变化的患者6 例,4男2女,年龄（59.00±16.64） 岁,体质量（71.67±10.37）kg,左心射血分数（LVEF）（61.33±2.16)%。患者签署知情同意书后,选择心功能正常需要监测动、静脉血流动力学变化的患者6 例,连续同时桡动脉、颈内静脉逐搏取血,测定PaO₂。选取2个典型呼吸周期,用于分析同时段动、静脉血气的波浪式变化。分别比较患者血氧分压最高和最低值,以验证同时段动、静脉血气是否都存在周期性波浪式信号变化。此外,将患者动脉、静脉血气周期性波浪式信号的变化幅度进行统计学t 检验分析,比较有无差异。结果: 共6例患者,抽取动、静脉血液充满肝素化细长塑化管需要15~16次心跳,即取血需要15~16次心跳,全部覆盖超过2个呼吸周期。所有患者动脉血气中PaO₂均呈现明显的波浪式变化（P<0.05）,幅度是（9.96±5.18）mmHg,是均值的（8.09±2.43）%。患者静脉血气中PaO₂波动幅度并不明显,为（1.63±0.41）mmHg,是均值的（3.91±1.22）%,与动脉血气组相比有明显统计学差异（P<0.05）。结论: 采用同时连续逐搏动、静脉取血血气分析法证实,患者自主呼吸时动脉血气有明显的周期性波浪式变化信号,而静脉血气几乎没有周期性波浪式变化信号（很弱）,说明动脉血气波浪式信号主要是由于肺通气过程中吸气和呼气期产生肺泡中氧分压规律性上升和下降,通过离开肺毛细血管与肺泡氧气压力平衡的动脉化血液,经过左心室搏血进入动脉血管系统所致。     

血清TM、P-selectin、HDL-C以及凝血功能指标与创伤性骨折患者术后深静脉血栓形成的关系研究

摘要 目的：探讨血清血栓调节蛋白（TM）、P-选择素（P-selectin）、高密度脂蛋白（HDL-C）以及凝血功能指标与创伤性骨折患者术后深静脉血栓形成（DVT）的关系。方法：选择2018年1月至2020年1月我院收治的术后发生DVT的创伤性骨折患者100例作为DVT组,同期术后未发生DVT的创伤性骨折患者100例作为无DVT组,比较两组血清TM、P-selectin、HDL-C、血浆凝血功能指标[凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、D-二聚体（D-D）],应用Pearson相关性分析血清TM、P-selectin、HDL-C与凝血功能指标的相关性,应用多因素Logistic回归分析创伤性骨折患者术后DVT的影响因素。结果：DVT组血清TM、P-selectin、血浆D-D、FIB水平、年龄≥60岁比例高于无DVT组,血清HDL-C水平低于无DVT组（P＜0.05）。DVT组血清TM和P-selectin与血浆D-D、FIB呈正相关（P＜0.05）,血清HDL-C与血浆D-D、FIB呈负相关（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,年龄≥60岁、血清TM≥9.50 IU/mL、P-selectin ≥70.00 ng/mL、HDL-C<1.00 mmol/L、血浆D-D≥700.00 μg/L、FIB≥4.00 g/L是创伤性骨折患者术后DVT的危险因素（P＜0.05）。结论：创伤性骨折患者术后发生DVT患者血清TM、P-selectin较无DVT患者升高,HDL-C较无DVT患者降低,联合检测血清TM、P-selectin、HDL-C和凝血功能指标可能有助于降低DVT的发生风险。     

Hemodynamic investigation of a patient-specific abdominal aortic aneurysm with iliac artery tortuosity

Abstract

This paper describes a systematic investigation on the hemodynamic environment in a patient-specific AAA with tortuous common iliac artery(CIA) and external iliac artery (EIA). 3D reconstructions from CT scans and subsequent computational simulation are carried out. It is found out that the Newtonian and non-Newtonian models have very similar flow field and WSS distribution. More importantly, it is revealed that the torturous CIA maintained its helical flow. It is concluded that the assumption of Newtonian blood is adequate in capturing the intra-aneurysmal hemodynamics. Moreover, it is speculated that the physiological spiral flow protects the twisted CIA from the thrombosis formation.