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抗白血病药物三尖杉酯碱对L1210细胞着丝粒蛋白含量及CenpB基因表达的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
以小鼠白血病细胞系L1210为对象,探讨了抗白血病药物三尖杉酯碱(Harringtonine,HT或Har)对细胞内着丝粒蛋白含量及着丝粒蛋白CenP基因表达的影响。间接免疫荧光(IIF)检测结果显示,随HT作用时间延长,L1210细胞着丝粒荧光斑点减弱;免疫印迹(Western blot)检测结果显示,所用的抗着丝粒抗血清(ACA 血清)能够识别8种不同分子量的着丝粒蛋白:140、80、70、56、37、34、32和17kD。受HT作用,细胞中这些着丝粒蛋白的含量不同程度地降低。在L1210细胞中识别17、80 and l40kD蛋白质的ACA抗体也分别与分子量相当的已知为CenpA、CenpB和CenpC的3种蛋白发生交叉反应。Northern和Dot blot显示,HT的抑制作用使细胞中CenpB mRNA表达水平较之对照细胞下降。结果表明,HT可(通过抑制基因mRNA的表达)降低细胞中某些着丝粒蛋白的含量;HT对细胞的杀伤及诱导凋亡作用可能与CenpB等着丝粒蛋白基因的表达抑制有关。 相似文献
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三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的生物活性及临床应用 总被引:1,自引:0,他引:1
概述了从粗榧料植物中分离的抗肿瘤生物碱三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱等的生物活性,包括其实验及临床药理、临床毒性、分子药理机制,化学研究和未来市场的研究展望。 相似文献
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本文对三尖杉科(属)中的三尖杉Cephalotaxus fortunei Hook f.植物中所含抗白血病的三尖杉酯碱harringtonine与高三尖杉酯碱homoharringtonine作了不同产地和不同部位的含量测定。 相似文献
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Apoptosisorprogrammedcelldeathhasrecentlybeenrecognizedasamodeofcelldeaththatcanbeactivatedinmanysystemsbyavarietyofchemicalandphysicalstimuli.Observationfromseverallaboratoriesindicatedthatmanyanticanceragentscaninduceapoptosisindifferenttypesofcell[… 相似文献
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锂和三尖杉酯碱对HL—60细胞增殖,分化和c—myc表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究利用细胞培养技术观察了氯化锂和三尖杉酯碱(HT)对HL-60细胞增殖的影响,不同浓度的氯化锂对HL-60细胞的集落形成和3H-TdR参入均呈剂量依赖式抑制;三尖杉酯碱亦有类似的作用。在培养体系中加氯化锂和三尖杉酯碱时,对HL-60细胞数及集落形成抑制作用与单用二者相比较有明显增加。用NBT还原试验,氯化锂和三尖杉酯碱均促进HL-60细胞的分化,小剂量氯化锂还能加强三尖杉酯碱对HL-60细胞诱导分化作用。从氯化锂和三尖杉酯碱处理的HL-60细胞中提取总RNA,应用RT/PCR检测c-myc的表达,结果表明经氯化锂和三尖杉酯碱处理的HL-60细胞c-myc表达均降低,与未处理的HL-60细胞c-myc比较,说明氯化锂和三尖杉酯碱均能抑制c-myc的表达,提示c-myc很可能在白血病细胞增殖、分化中起调控作用。 相似文献
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该研究利用短发卡RNA(small hairpinin RNA,shRNA)表达载体沉默HT9急性早幼粒白血病耐药细胞MDRl基因表达,以提高细胞对三尖杉酯碱、阿霉素的敏感性。通过设计合成编码shRNA的DNA模板序列,定向克隆到pSilencer2.1-u6neo质粒,成功构建1个P-gP蛋白基因特异的shRNA表达载体,稳定电转染HT9细胞,实时荧光定量PCR分析MDRlmRYAg表达,Westem blot检测细胞P—gp蛋白表达,流式细胞术检测P—gP蛋白外排泵功能,MTT法检测细胞对药物敏感性。结果显示,成功构建了shRNA表达载体pSilencer2-1-U6neo—MDRl,转染HT9细胞后,PCR检测重组质粒整合到HT9/sh-2-1-1细胞基因组DNA,获得稳定遗传;HT9/sh-2-1—1细胞MDRlmRNA表达降低了78.84%(P〈0.01),P—gP蛋白表达降低了48.27%(P〈0.05),细胞内Rh0123相对荧光强度由(10.8±0.58)%升高至(73.56±1.37m;转染细胞对三尖杉酯碱、阿霉素敏感性明显增强,IC50分别由(2.06±0.15)gmol/L降至(0.57±0.01)gmol/L、(4.04±017)gmol/L降至(1.56±0.05)μtmol/L。提示shRNA干扰表达载体pSilencer2.1-U6neo—MDRl能够稳定、持久地抑制MDRI基因表达,并能有效增强HT9细胞对三尖杉酯碱、阿霉素的敏感性。 相似文献
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