人体膀胱移行细胞癌细胞系KGBC的建立及其生物学特性

本文报告建立了一株人膀胱移行细胞癌细胞系,命名为KGBC。KGBC细胞已在体外培养了10个月,传代65代。组织培养中,KGBC细胞形态为上皮样,呈单层或多层生长,接触抑制消失。光镜和电镜下,KGBC细胞的形态结构与膀胱移行细胞癌的形态结构相似。第27代和第42代细胞异种移植,能在小鼠体内生长,组织相与原发癌相似。第9代和第21代细胞的染色体数从65到190条,众数为90—95条。第35代细胞倍增时间为28小时。细胞经液氮保存,复苏良好。这些表明已建立了一株能在体外稳定生长的人膀胱癌细胞系。     

大鼠非致瘤四倍体细胞系的建立及细胞遗传学和酶学特征

从大鼠自然诱发的肉瘤细胞中,我们建立了一个四倍体细胞系(4n=84),命名为RC(ratcell)。它具有典型的成纤维细胞外形,能在玻璃表面贴壁生长,但不能生长在琼脂半固体培养基中。该细胞在含15％小牛血清的RPMI 1640培养基中生长良好,至今已连续繁殖112世代,细胞群体倍增时间约为15小时。染色体G-带分析表明,RC为整四倍体细胞,它的1条X染色体在第32至34区为均染区。RC细胞核仁组织者(NORs)活性显然比大鼠二倍体细胞NORs活性的加倍还高(P<0.001)。这个具有非常高NORs活性的RC细胞系对于研究细胞18S+28S rRNA基因转录活性的调控、基因表达与基因剂量关系有一定的意义。RC细胞还有异常高的磷酸酯酶活性,而且它的同工酶谱也与大鼠肌肉细胞明显不同。体内接种实验和扫描电镜的观察表明,RC是非致瘤细胞。RC细胞各号染色体的C-带图样与大鼠二倍体细胞无明显的差异。     

体外培养周期型马来丝虫感染期幼虫

关于体外培养周期型马来丝虫(periodic Brugia malayi)感染期幼虫(L_3),近年来国内外有一些报道,系应用含哺乳动物组织细胞系或原代细胞的培养系统培养彭亨丝虫和马来丝虫L_3,可使其幼虫发育至Ⅳ期蚴(L-4)或早期成虫(Chen and Howells,1979; Wong et al.,1982;Mak et al.,1983;郑惠君等,1984)。但未见应用含人体组织细胞系的体外培养系统培养布鲁属丝虫L_3的报道。本研究     

组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）工程细胞系遗传特性及成瘤性分析

组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)因其在防止血栓形成中起重要作用而受到人们的重视。但由于t-PA在血液中半衰期很短,作为溶栓药,一时难于推广。为了延长半衰期、增强其特异活性,本组构建了t-PA突变体并在CHO-dhfr~-细胞中获得了高效表达。我们在细胞培养基中加入秋水仙素,通过低张、固定、染色,进行染色体分析,结果表明,t-PA工程细胞系染色体条数为20条,畸变类型有异着丝粒。四倍体、裂隙、断片,畸变率为15％,属于正常范围。同时我们对该细胞系进行成瘤性试验,选用4周龄裸鼠作为试验鼠,以Hela细胞为阳性对照,CHO-dhfr~-细胞为阴性对照,试验表明:t-PA工程细胞及表达产物对裸鼠均无成瘤性。     

Plant regeneration from protoplasts of hydroxyproline resistant cell line in Onobrychis viciaefolia

An efficient protocol for plant regeneration from protoplasts of hydroxyproline(HYP)resistant cell line of Onobrychis viciaefolia was established.In SH medium supplemented with 1mg/L2,4-dichlorophenoxy-acetic acid(2,4-D),0.5mg/L kinetin(KT)and 0.2mg/L naphthalene acetic acid(NAA),the division frequency of protoplastderived cells reached up to over 60%,and microcalli were obtained in 5-6wk.Upon transferring them on agar solidified MS medium plus 2mg/L indole-3-acetic acid (IAA),shoots were induced.After cultivating them on MS medium with or without IAA,roots were regenerated.Chromosome number of all protoplast-regenerated plants examined were normal(2n=28).The protoplast-derived calli and plants grew vigorously on the medium containing 10 mmol/L HYP.     

人成纤维细胞系HF—91的建立及生物学特性

人胚胎胰腺结缔组织经分离培养成人成纤维细胞系ＨＦ－９１,传４０代。该细胞贴壁生长,具有密度依赖性抑制性质。它的生长依赖于成纤维细胞生长因子的存在,在１０ｎｇ／１００ｎｇ／ｍｌ浓度范围内,细胞生长与ｂＦＧＦ的浓度成正相关。细胞群体倍增时间２３．８±５．３ｈ。有丝分裂指数４９．３％±４．１％染色体众数２ｎ＝４６,占８７．５％±４．１％。染色体众数２ｎ＝４６,占８７．５％－９１．０％,乳酸脱氢酮同工酶Ｌ     

Vero细胞毒素大肠菌（VTEC）的分离及表型和分子生物学特性的研究

２６株Ｖｅｒｏ细胞毒素（ＶＴ）阳性大肠菌,经分子生物学鉴定表明,其中１４株与ＥＨＥＣ探针杂交阳性,按Ｌｅｖｉｎｅ等的标准判定属产Ｖｅｒｏ细胞毒素大肠菌（ＶＴＥＣ）,其血清型为Ｏ_１５７：Ｈ_７３株（血便２株,脓血便１株）,Ｏ_２５７ＮＭ３株（血便１株,腹泻牛便２株）,Ｏ_２９样便１株）;其余１２株虽ＶＴ毒素阳性,但ＥＨＥＣ探针阴性,按标准判定尚难确认,有待进一步研究。     

不同来源的肾综合征出血热病毒对Vero细胞的致病变作用

前文报道,肾综合征出血热病毒76-118株能使Vero细胞产生病变。本文报道76-118株和另11株不同来源的肾综合征出血热病毒(H537、A9、H5、R178、HB55、R22、Z10,沟3、L99、A16和J10)对Vero细胞的致病变作用(CPE )。其中除沟3株外,大部分毒株在感染Vero细胞后的第一代即可见明显的CPE。CPE的特点与76-118株相似,主要是感染细胞粘聚、融合,形成网状结构。CPE能被特异性抗HFRS病毒血清和型特异性单克隆抗体所中和抑制,但不能被特异性抗呼肠孤病毒Ⅲ型免疫血清所中和抑制。HFRS病毒对Vero细胞的致病变作用,对进一步研究HFRS病毒的某些生物学特性及实验方法等均有重要意义。     

核多角体病毒在昆虫细胞系内的装配方式

本文对AcNpV、HaNPV和EsNPV在各自敏感细胞系内的装配过程作了研究。除在复制时间上稍有差别外,均具以下特点：核衣壳装配与病毒基质(Vs)和发夹结构(HC)有密切的关系,有些核衣壳尚需经剪切加工;有两种表型子代病毒,封存体(OB)和未埋入型病毒(NOV);前者在核内完成装配,后者可在核内、核膜上、胞质内或细胞膜上完成套膜装配,且与细胞膜系统密切相关;AcNPV复制晚期出现不完全装配现象．