T-bet、GATA-3 与T 细胞亚群在再障中的相关性研究

目的:探讨外周血中T-bet和GATA-3 mRNA的表达在再生障碍性贫血中的发病机制及意义。方法:入选27例再障患者,其中重型再障15例,轻型再障l2例,25例健康体检者为对照组。采用流式细胞术检测参试者外周血Thl和Th2细胞,RT-PCR检测外周血单核细胞中转录因子T-bet和GATA-3 mRNA的表达。结果:与健康对照组相比,再障患者血浆T-bet mRNA与Th1细胞比例显著升高(P<0.01),GATA-3 mRNA与Th2细胞明显降低(P<0.05、P<0.01)。与轻型再障患者相比,重型再障患者血浆转录因子T-bet mRNA及Th1细胞比例均明显升高(P<0.01),GATA-3 mRNA水平与Th2细胞比例也显著下降(P<0.05、P<0.01)。结论:T-bet与GATA-3异常表达可增强Th1细胞功能,抑制Th2细胞功能,导致患者免疫功能异常,最终引起再障发生、发展。     

柴苓汤治疗自身免疫相关复发性流产的分子机理初探

目的:研究柴苓汤对外周血单个核细胞(PBMCs)Th1/Th2特异性转录因子T-bet/GATA-3 mRNA转录的影响,从基因水平探讨其治疗自身免疫性复发性流产的机理。方法:体外分离提取外周血单核细胞,在含有不同浓度柴苓汤的培养基中培养24 h,采用实时定量PCR技术检测T-bet和GATA-3 mRNA的表达。结果:柴苓汤浓度为10 g/ml时,PBMCs的T-bet mRNA表达水平(2.89±0.84)较对照组(1.66±0.14)增高,差异有显著性(P<0.05)。用1、10、100 g/ml浓度柴苓汤分别处理,GATA-3 mRNA的表达水平与对照组比较均无明显差异。结论:柴苓汤可上调转录因子T-bet mRNA的表达,进而可能通过增强Th1细胞因子产生、纠正自身免疫性复发性流产中Th2反应异常增强的Th1/Th2失衡状态,对其发挥治疗效应。     

T-bet+ Memory B Cells Link to Local Cross-Reactive IgG upon Human Rhinovirus Infection

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T—bet的生物学特性和研究进展

T-bet是T-box基因家族的新型转录因子,选择性的表达于Th1细胞,诱导干扰素γ的生成,在Th1细胞的分化中起着决定性的作用,并参与调控机体的免疫应答。随着人们对该转录因子研究的深入,发现T-bet的表达与Th1／Th2比例失衡有着密切的关系,并在多种疾病的发病机制中充当重要的角色。此文就T-bet的生物学特性及其与疾病的联系做一综述。     

NFκB attenuates IL-5 production and upregulates T-box transcription factors in Th2-like T cells

IL-5 plays important roles in eosinophil differentiation, expansion, and recruitment. The regulation of IL-5 seems critical for the treatment of eosinophil-mediated allergic reactions. However, the precise mechanisms for IL-5 regulation remain unknown. In this study, we investigated how IL-5 production is regulated. The transduction of GATA-3 into a murine T cell hybridoma resulted in acquiring the ability to produce IL-5 in response to an antigenic stimulus like Th2 cells. This production was dependent on the cAMP-PKA pathway, but not on p38 activation. Transduction of NIK largely impaired IL-5 production. RelA and RelB similarly impaired IL-5 production. RelA decreased not only IL-5 protein amount but mRNA. RelA also inhibited Il5-luciferase reporter activity. The transduction of GATA-3 decreased the expression of Tbx21 and Eomes, but the additional transduction of RelA abrogated the decreased expression of GATA-3-induced Tbx21 and Eomes. Furthermore, the transduction of T-bet or Eomes into the GATA-3-transduced T cell hybridoma impaired IL-5 production. These results suggested that strong enhancement of the NFκB pathway downregulates IL-5 production and upregulates T-box protein expression to shift an immune response from Th2 to inflammatory Th1.     

小鼠T-bet启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性鉴定

为了研究T-bet在T细胞中的转录调控机制,并研究其在多发性硬化症中的信号通路,本研究构建小鼠TBX21(编码T-bet)基因启动子区和增强子区萤火虫荧光素酶报告基因载体。在对小鼠TBX21基因5?侧翼区进行详尽生物信息学特征分析后,设计相应引物,用PCR的方法从小鼠基因组中扩增出TBX21基因5?侧翼区–1 000 bp-28 bp片段长为1 028 bp的启动子区(以翻译起始点ATG为+1)和–3 308 bp-–2 000 bp片段长为1308 bp的非编码区保守序列(No-coding conserved sequence,CNS),再用定向克隆的方法将这两个片段定向重组入专门用于启动子活性研究的萤火虫荧光素酶报告基因载体(p GL4.10)中,构建出包含小鼠TBX21基因启动子区和CNS区的萤火虫荧光素酶报告基因载体(p GL4.10-TBX21pr-CNS),电泳与测序鉴定,最后再将p GL4.10-TBX21pr-CNS与内参p RL-TK用lipofectamine 2000共转染293T细胞和Jurkat细胞中,通过双荧光素酶报告基因检测系统鉴定p GL4.10-TBX21pr-CNS的启动子和增强子活性,并用独立样本t检验方法进行统计分析。对照组共转染p GL4.10与内参p RL-TK。结果表明,成功构建出荧光素酶报告基因重组质粒p GL4.10-TBX21pr-CNS。与转染空质粒p RL-TK组相比,293T细胞(P=0.012 2)和Jurkat细胞(P=0.002 2)中转染p GL4.10-TBX21pr-CNS组荧光素酶活性升高。研究结果表明在293T细胞和Jurkat细胞中p GL4.10-TBX21pr-CNS可以表现出启动子活性,为后续小鼠T-bet转录调控研究提供了基本材料。