一类新型的作用于钾离子通道的蝎毒素多肽

一类新型的作用于钾离子通道的蝎毒素多肽吉永华,刘艳（中国科学院上海生理研究所上海２０００３１）根据Ｋ＋通道的生理和药理特征,它们构成了迄今离子通道研究中一组种类和功能最繁多的蛋白家族。这些通道在诸如肌肉的收缩、神经的分泌、动作电位的频率与延续、体内电...     

蝎毒对人肝癌细胞（SMMC7721）和宫颈癌（Hela）细胞抑制作用的研究

目的：探讨蝎毒粗粉及经初步纯化的蝎毒对人肝癌细胞（SMMC7721）和Hela细胞株的抑制作用。方法：以四甲基偶氮唑盐法（MTT）,Western Blotting,免疫细胞化学以及荧光标记的方法,对人肝癌细胞（SMMC7721）和Hela细胞株的凋亡相关蛋白进行检测。结果：蝎毒粗毒及经初步纯化的蝎毒具有诱导SMMC7721和Hela凋亡的作用。结论：蝎毒粗毒及经初步纯化的蝎毒对人肝癌细胞（SMMC7721）及Hela细胞的生长具有明显的抑制作用。     

蝎毒对人肝癌细胞(SMMC7721)和宫颈癌(Hela)细胞抑制作用的研究

目的:探讨蝎毒粗粉及经初步纯化的蝎毒对人肝癌细胞(SMMC7721)和Hela细胞株的抑制作用。方法:以四甲基偶氮唑盐法(MTT),Western Blotting,免疫细胞化学以及荧光标记的方法,对人肝癌细胞(SMMC7721)和Hela细胞株的凋亡相关蛋白进行检测。结果:蝎毒粗毒及经初步纯化的蝎毒具有诱导SMMC7721和Hela凋亡的作用。结论:蝎毒粗毒及经初步纯化的蝎毒对人肝癌细胞(SMMC 7721)及Hela细胞的生长具有明显的抑制作用。     

重组棉铃虫病毒的外源基因向其他生物的转移

本文报道了基因工程棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV-AaIT)的外源蝎子毒素基因(AaIT)是否会向环境中的植物病原微生物或捕食性天敌转移的实验结果。首先,于实验室内将重组病毒HaSNPV-AaIT与棉花黄萎病病菌(VerticilliumdahliaeLleb.)进行了长达90d的混合培养,在混合培养30d,60d和90d后分别提取棉花黄萎病病菌的基因组DNA,用AaIT基因作探针进行点杂交,结果显示无阳性信号。另外,从多次施用过重组病毒的棉花田中采集了120只龟纹瓢虫和七星瓢虫,利用健康蚜虫饲养3-4d,用碱解液处理瓢虫体表后,从处理液中可以检测到病毒DNA;但瓢虫体表经碱解液和Dnase处理后,从瓢虫体内提取的基因组DNA,用PCR和斑点杂交的方法,都没有检测到AaIT的序列存在。本研究的实验结果说明,基因工程病毒的外源基因向其它生物转移的可能性极低。     

双价抗虫基因植物表达载体的构建

将蝎毒基因BmKITS和几丁质酶基因chitinase2个抗虫基因采用不同的启动子ubi或35S,连到2个高效的植物表达载体pWM101和pBI101中,2个重组表达质粒分别经过限制性酶切分析和PCR鉴定,实验结果表明2个含有双价抗虫基因的植物重组表达质粒均已构建成功．     

蝎毒的采集与加工

蝎毒是由蝎尾部毒腺分泌的一种成份复杂的有毒蛋白质。近几年来,国内外对蝎毒进行大量研究结果表明,蝎毒中具有生物活性很高的蝎毒素,不但在生物学研究中有广泛的应用,而且具有许多重要的生理功能。我国中医历来认为,全蝎是治疗神经系统疾病必不可少的良药,而其中起主要作用的就是蝎毒。可见,蝎毒是一种有着广阔应用前景的动物毒素。我国蝎资源极为丰富,仅东亚钳蝎一个种类就分布在长江以北到辽宁铁岭以南的宽广区域。提取蝎毒,能更有效地利用这一宝贵的生物资源,必将成为我国广大产蝎区农民的新的经济来源。提取蝎毒主要有三种方…     

蝎毒抗癌组分SVⅡ分离法的优化研究

目的比较三种柱径的分子筛G-50凝胶层析柱分离东亚钳蝎蝎毒的柱效;并对分离所得组分作MTT（酶反应比色法）抗肿瘤活性作用研究,为从中研制和开发出高效、低毒的新型抗癌特效药筛选出目标组分。方法（1）采用三种规格的分子筛层析柱分离蝎毒;（2）HPLC色谱分析比较各组分的指纹图谱;（3）MTT法观察不同浓度（1、10、100mg／L）的蝎毒及其组分对四种肿瘤细胞（HL-60、A549、K562／ADR、K562／S等）的毒性作用。结果经过分子筛柱层析,可从蝎毒（Scorpion venom,SV）获取三个组分SVⅠ、SVⅡ、SVⅢ;经HPLC色谱分析,各组分明显含有四种以上单体成分;MTT法研究表明,SVⅡ对四种肿瘤细胞的细胞毒性较原毒强,剂量-效应关系较好,而SVⅠ、SVⅢ对四种肿瘤细胞抑制作用不明显。结论（1）利用大柱径的层析柱分离蝎毒的柱效较高;（2）组分SVⅡ是蝎毒抗癌的目标组分,且其对耐药细胞株（K562／ADR）的抑制作用比阳性对照组强,有待进一步的分离纯化,筛选出色谱纯的抗癌活性成分（多肽单体）。     

基于基因芯片蝎毒多肽提取物对H22肝癌抑制作用的研究

目的:通过表达谱基因芯片研究蝎毒多肽提取物PESV对H22肝癌基因表达的影响,探讨其可能的药物作用机理.方法:建立H22肝癌皮下荷瘤模型,将60只昆明小鼠随机分为模型组、PESV组、Gemcitabine和TNP-40组,每组15只;无菌摘取皮下肿瘤组织,提取总RNA,通过反转录方法制备cDNA荧光探针,进行芯片杂交,然后对芯片进行图像扫描,最后用Imagene4.0软件包对荧光信号进行分析.结果:蝎毒多肽提取物PESV作用于荷瘤小鼠后,有127个基因表达下调,433个基因表达明显上调,其中35个基因与抗肿瘤血管生成药物TNP-470处理组下调基因一致,有40个与化疗药物Gemcitabine处理组下调基因一致.结论:蝎毒多肽提取物PESV可能同时具有细胞毒作用和抗血管生成作用双重作用,有望成为一种极具前景的肿瘤治疗药物.     

重组棉铃虫病毒的外源基因向其他生物的转移

本文报道了基因工程棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV-AaIT)的外源蝎子毒素基因(AaIT)是否会向环境中的植物病原微生物或捕食性天敌转移的实验结果.首先,于实验室内将重组病毒HaSNPV-AaIT与棉花黄萎病病菌(Verticillium dahliae Lleb.)进行了长达90d的混合培养,在混合培养30d,60d和90d后分别提取棉花黄萎病病菌的基因组DNA,用AaIT基因作探针进行点杂交,结果显示无阳性信号.另外,从多次施用过重组病毒的棉花田中采集了120只龟纹瓢虫和七星瓢虫,利用健康蚜虫饲养3-4d,用碱解液处理瓢虫体表后,从处理液中可以检测到病毒DNA;但瓢虫体表经碱解液和Dnase处理后,从瓢虫体内提取的基因组DNA,用PCR和斑点杂交的方法,都没有检测到AaIT的序列存在.本研究的实验结果说明,基因工程病毒的外源基因向其它生物转移的可能性极低.     

蝎毒诱导红藻氨酸癫痫大鼠海马内胆囊收缩素原mRNA的表达

目的和方法：本工作用红藻氨酸（ＫＡ）癫痫模型,对用蝎毒处理住房第马内胆囊收缩素原ｍＲＮＡ（ＰＣＣＫ ｍＲＮＡ）表达进行原位杂交观察,并对国产东亚钳蝎粗毒抗癫痫反复发作的机制做了初步探讨。结果：原位杂交的实验显示,三周ＫＡ后,实验对照组与空白对照组相比,腹侧海马是海马门区ＰＣＣＫ ｍＲＮＡ阳性神经元数目明显减少（Ｐ〈０．０５）;实验给药组大鼠８例,其中有６例腹侧海马门区ＰＣＣＫ ｍＲＮＡ阳性神经元数