大麦耐酸铝愈伤组织变异体的筛选及其特性研究

从对酸铝敏感的栽培大麦品种“早熟3号”的花药和幼胚培养物中,分别诱导了单倍体和二倍体愈伤组织。并筛选出生长快、质地松散的愈伤组织系,在不同的 pH、铝浓度培养基中观察其生长情况,建立耐酸铝愈伤组织变异体筛选条件(pH 4.5,Al~(+3)10 ppm)。并从经5000Rad γ-射线处理和未处理的材料中筛选到耐性变异体。比较结果表明,在酸铝条件下,变异体与原始型在愈伤组织生长速度、呼吸强度上存在显著差异。并且在 pH4.5,Al~(+3)10—20ppm时,变异体能基本正常生长,细胞呈圆形,荧光强度测定表明细胞活力大;而原始型在同样条件下基本停止生长,细胞呈长柱形和椭圆形,荧光强度弱、活力低。两者间过氧化物酶同工酶酶谱也存在差异。至今还未能从单倍体耐性变异系分化成植株,但在二倍体愈伤组织的筛选过程中直接成苗5株,3株在越夏和移栽中死亡。对存活结种子的2株后代鉴定结果为耐性,适应在酸铝红壤上生长,但农艺性状和品质性状还需进一步改良。最后,讨论了离体筛选技术在改良大麦耐酸铝性育种中的应用。     

一株耐铝隐球酵母菌株5-2的分离鉴定及耐铝特性分析

目的分离高耐铝的微生物菌株,为耐铝基因克隆和耐铝机制研究奠定基础。方法用含5 mmol/L铝的平板逐级筛选和纯化,PCR扩增ITS序列和26S r DNA D1/D2序列,用菌株在不同铝浓度的固体培养基和液体培养基中的生长状况鉴定耐铝能力,用ICP-AES测量菌液上清中剩余活性铝的含量。结果通过ITS序列和26S r DNA D1/D2序列比对及形态观察,初步鉴定该菌株为Cryptococcus podzolicus,该菌株的最大耐铝能力达到100 mmol/L,而且该菌株能够吸附溶液中的活性铝,这可能是其耐铝的原因之一。结论该菌种是首次发现具有耐铝能力,从而为土壤微生物耐铝机制的研究及克隆耐铝基因提供了很好的实验材料。