PDE2A通过影响脉络膜血管生成和NADPH氧化酶/ROS/NF-κB通路参与年龄相关性黄斑变性

摘要 目的：探究磷酸二酯酶2A（Phosphodiesterase 2A,PDE2A）在年龄相关性黄斑变性（Age-related macular degeneration,AMD）中的可能作用及其对脉络膜新生血管（Choroidal neovascularization,CNV）形成的影响。方法：通过qRT-PCR法检测36例湿性AMD患者（AMD组）和36例健康体检者（Healthy组）的血清PDE2A水平。将恒河猴脉络膜血管内皮细胞系（RF/6A）分为Normoxia组、Hypoxia组、Hypoxia+NC组、Hypoxia+PDE2A组。使用Lipofectamine2000分别将NC-shRNA和PDE2A-shRNA慢病毒转染入Hypoxia+NC组和Hypoxia+PDE2A组,转染后,根据分组情况,在RPMI 1640培养基中添加200 mM CoCl₂来对RF/6A细胞进行低氧处理。建立了激光诱导的CNV小鼠模型后,将36只建模成功的小鼠随机分为Model组、NC-shRNA组和PDE2A-shRNA组,每组12只。选取12只未建模的小鼠作为Control组。分别对NC-shRNA组和PDE2A-shRNA组小鼠玻璃体腔注射相应慢病毒,共治疗7 d。然后对小鼠进行眼底荧光血管造影（fundus fluorescein angiography,FFA）检查和眼球HE染色。使用相应试剂盒检测小鼠脉络膜组织中ROS、SOD、MDA的含量。通过qRT-PCR或Western blot检测RF/6A细胞或脉络膜组织中PDE2A、VEGFA、VEGFR2、HIF-1α、NOX2、NOX4和NF-κB p65的表达。结果：与Healthy组相比,AMD组患者的血清PDE2A水平显著升高（1.00±0.23 vs 3.09±1.46, P<0.001）。与Hypoxia组相比,Hypoxia+PDE2A组RF/6A细胞的闭合管腔数量减少（P<0.05）,PDE2A、VEGFA、VEGFR2和HIF-1?琢的mRNA和蛋白表达水平均降低（P<0.05）。与Model组相比,PDE2A-shRNA组CNV小鼠脉络膜病变明显减轻,血管生成和脉络膜增明显减少,CNV相对荧光强度降低（P<0.05）,脉络膜组织中的PDE2A、VEGFA、VEGFR2和HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平均降低（P<0.05）。与Model组相比,PDE2A-shRNA组小鼠脉络膜组织中的ROS和MDA含量均降低,SOD含量升高（P<0.05）。与Model组相比,PDE2A-shRNA组小鼠脉络膜组织中的NOX2、NOX4和细胞核NF-κB p65蛋白相对表达量均降低（P<0.05）。结论：PDE2A通过影响脉络膜血管生成和NADPH氧化酶/ROS/NF-κB通路参与年龄相关性黄斑变性。     

红边绿菇及其近似种的比较研究

本文报道红菇属(Russula)一新种:红边绿菇Russula viridi-rubrolimbata Ying sp.nov.。该种属于红菇科Russulaceae红边红菇组Section Rigidae Fr.变绿红菇亚组Subsection Virescentinae Sing.。新种在菌盖的色泽上,在菌盖表皮的球状胞及其顶生联丝,以及担孢子和囊状体的大小上,均有别于近似种。文中对新种作了汉文和拉丁文描述,文中附有彩图及内部结构图,并讨论了新种与其近似种之间的区别。     

炭疽水肿因子在大肠杆菌中高效表达及一步法纯化

【目的】本研究旨在建立一种简单快捷的炭疽水肿因子(EF)重组表达及纯化方法。【方法】构建GST-EF融合表达载体,基于EF基因的密码子使用偏好,选择菌株Escherichia coli BL21-Codon Plus(DE3)-RIL为表达宿主,对EF进行诱导表达;细胞透性技术分离粗蛋白,进而利用亲和层析一步法纯化EF;Native-PAGE、竞争性抑制实验及c AMP浓度分析用于鉴定EF的生物活性。【结果】实现了EF可溶性高效表达,透性化处理可有效抽提可溶性重组蛋白;利用亲和层析一步法纯化得到了纯度达96%的EF;EF可与保护性抗原(PA)结合形成水肿毒素,该毒素能够急剧提高CHO-K1细胞中c AMP的浓度。【结论】本研究建立了一种高效快速制备具有生物活性的炭疽水肿因子的方法,为炭疽相关研究工作提供了新的选择。     

糖尿病白内障术后黄斑水肿与房水细胞因子的关系

为了探讨2型糖尿病白内障术后黄斑水肿与房水中细胞因子的关系,本研究选取2016年2月至2017年7月在我院治疗的2型糖尿病白内障患者117例117眼,均行超声乳化白内障摘除术,观察术后4周黄斑水肿发生情况以及房水中多种细胞因子水平。研究结果显示:术后4周,有37眼发生黄斑水肿(观察组),未发生黄斑水肿80眼(对照组);观察组术后4周黄斑区视网膜厚度为(247.28±18.37)μm,明显高于对照组(p<0.05),且明显高于术前水平(p<0.05);观察组术后4周干扰素诱导蛋白-10 (IP-10)、巨噬细胞趋化蛋白(MCP-1)、血管内皮生长因子(VEGF)和细胞因子转化生长因子-β2 (TGF-β2)水平分别为(6.01±0.89) pg/mL、(340.03±45.39) pg/mL、(812.28±40.06) pg/mL和(40.05±10.03) pg/mL,明显高于对照组(p<0.05),且高于术前水平(p<0.05);观察组和对照组手术前后粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)比较差异无统计学意义(p>0.05);术后4周IP-10、MCP-1、VEGF和TGF-β2水平与黄斑区视网膜厚度呈正相关(r=0.452, 0.501, 0.466和0.470, p<0.05)。本研究的结果初步说明,房水中IP-10、MCP-1、VEGF和TGF-2水平与2型糖尿病白内障术后黄斑水肿有一定关系,有可能成为黄斑水肿的特异性评价指标,值得进一步研究。     

一个Ⅰ型遗传性淋巴水肿中国家系的VEGFR3基因的新突变方式

通过对国人Ⅰ型遗传性淋巴水肿一家系分子遗传学检测,报告VEGFR-3基因新突变。首先在Ⅰ型遗传性淋巴水肿对该家系进行致病基因的连锁分析,然后用DNA直接测序方法进行基因突变分析。连锁分析和单倍体分析确定该家系致病基因位于5q35.3,与Ⅰ型遗传性淋巴水肿连锁。VEGFR-3基因突变分析发现了一个新的错义突变D1055V,该错义突变在家系中共分离,且在100个正常对照组中未发现该序列改变。本研究首次报告了国内Ⅰ型遗传性淋巴水肿VEGFR-3基因新的错义突变D1055V,丰富了VEGFR-3基因基因突变谱,为今后开展遗传性淋巴水肿的基因诊断和遗传咨询奠定基础。     

雷珠单抗联合复方血栓通胶囊对年龄相关性黄斑变性患者血液流变学和血清VEGF、PDGF的影响

摘要 目的：观察雷珠单抗联合复方血栓通胶囊对年龄相关性黄斑变性（AMD）患者血液流变学和血清血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）的影响。方法：选取我院2019年6月~2021年1月收治的AMD患者60例（96眼）,按照随机数字表法分别为对照组（n=30,46眼）和实验组（n=30,50眼）,对照组给予雷珠单抗治疗,实验组给予雷珠单抗联合复方血栓通胶囊治疗,对比两组眼部相关指标、血液流变学指标和血清VEGF、PDGF水平变化情况,观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果：实验组治疗3个月后眼内压（IOP）、黄斑中央区厚度（CMT）、脉络新生血管（CNV）面积低于对照组,视力高于对照组（P<0.05）。实验组治疗3个月后全血低切/中切/高切黏度、血浆黏度低于对照组（P<0.05）。实验组治疗3个月后血清VEGF、PDGF水平低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率对比无差异（P>0.05）。结论：雷珠单抗联合复方血栓通胶囊可改善AMD临床症状,促进视力恢复,其作用机制可能与调节机体血液流变学、血清VEGF、PDGF水平有关。     

新生血管性年龄相关性黄斑变性对抗VEGF治疗的耐药性危险因素分析

摘要 目的：探究新生血管性年龄相关性黄斑变性对抗血管内皮生长因子（VEGF）治疗的耐药性危险因素。方法：选取2019年5月至2021年5月于我院接受治疗的90例nAMD患者作为研究对象,进行VEGF治疗,根据患者的耐药情况将其分为耐药组（n=19）和非耐药组（n=71）,统计患者资料,对比分析产生耐药性的危险因素。结果：危险因素与AMD类型、PED、椭圆体带完整性、积液、出血、BCVA、眼压、CRT异常有关（P<0.05）,危险因素与性别和平均年龄无关（P>0.05）;Ⅰ型CNV患者在VEGF治疗前后CRT水平未出现显著变化（P>0.05）,II型CNV患者和混合型CNV患者治疗前后CRT水平均显著降低（P<0.05）。Logistic回归分析显示：最终进入主效应模型的因素即抗VEGF治疗的耐药性发生的多因素为积液、PED、出血、AMD类型。结论：新生血管性年龄相关性黄斑变性（nAMD）对抗VEGF治疗出现耐药性与积液、出血和AMD类型有关。     

与老年黄斑病变有关的单核苷酸多态性

老年黄斑病变(AMD)是导致50岁以上的人失明的最常见的原因,它部分的原因是继承了易感基因。在AMD中,视网膜中的感光细胞受损,导致中央视觉逐渐消失。AMD有2种：湿型和干型。湿型AMD对患者危害最严重,因为视觉消失的速     

封闭负压引流对兔糖尿病溃疡创面组织愈合影响的观察

目的:探讨封闭负压引流(VAC)对兔糖尿病溃疡创面组织愈合的影响及其可能机制。方法:采用四氧嘧啶法建立兔糖尿病溃疡模型,设空白对照组和实验组(对照组创面采用常规包扎治疗处理,实验组创面则采用VAC处理),观察和比较两组动物的创面肉眼观、愈合时间,在致伤前、致伤后3 d、7 d、14 d取创面软组织,检测和比较两组动物的创面组织含水量、血流量以及血浆ET-1和NO含量。结果:与对照组比较,实验组动物的创面肿胀及分泌物得到明显控制,创面坏死组织的清除与肉芽组织的生长明显加快,平均愈合时间明显缩短(P0.05);致伤后3 d、7 d和14 d,创面组织含水量与血浆ET-1含量明显下降(P0.05),创面组织血流量与血浆NO含量明显增加(P0.05)。结论:VAC对兔糖尿病溃疡创面组织的愈合可起到积极的促进作用,这可能与其增加血浆NO含量及降低ET-1的含量有关,其具体机制尚有待于进一步的研究。     

《美国眼科学杂志》：老年人戒烟可降低患老年黄斑变性风险

美国一项最新研究显示,老年人戒烟可以降低患老年黄斑变性的风险。从而有助于预防老年人失明。这一研究成果刊登在新一期《美国眼科学杂志》