~(60)CO-γ射线诱发的德国蜚蠊精母细胞中心体畸变

德国蜚蠊经不同剂量的~(60)Co-γ射线照射,以光镜和电镜观察精母细胞巨大中心体结构和数目的变化,发现:γ射线可诱发各种类型中心体畸变,如棒状、断裂、不分离、超数和微小中心体等;畸变率随剂量增加而升高;畸变类型和辐射剂量有密切关系,低剂量(500—1000r)诱发较多的棒状中心体和中心体断裂、中等剂量(2000r)诱发较多的超数中心体和中心体不分离、高剂量(5000r)诱发较多的微小中心体,看来低剂量γ射线主要影响中心体结构,高剂量则对中心体的生长发育有明显的阻滞作用。本文还讨论了中心体畸变的可能产生机制及在遗传毒理研究中应用的前景。     

HL—60细胞诱导分化过程中蛋白质酪氨酸磷酸化水平的改变

对ＲＡ、ＨＨＴ和ＷＢ６５２诱导ＨＬ－６０细胞过程中,细胞浆和膜溶脱部分的蛋白质酪氨酸磷酸化水平变化进行了对比研究。结果发现,在胞浆部分主要有四种含有Ｐ－Ｔｙｒ的蛋白,而且８０ｋＤ蛋白酪氨酸磷酸化水平随着诱导发生变化。诱导前后内源性蛋白上Ｐ－Ｔｙｒ百分含量也发生了改变。     

微小根毛霉感染机理研究

本文在首次报告二例肺结核、糖尿病患者合并感染肺微小根毛霉的基础上,进一步探讨免疫功能受损与微小根毛霉感染关系。本文采用不同剂量~(60)Co-γ全身辐照小鼠,然后以不同途径注射同剂量的微小根毛霉的孢囊孢子,观察动物的感染情况和感染后的真菌检出率,结果发现各种辐射剂量均在辐射后7-14日感染菌的检出率最高;各种脏器感染菌的检出率以脾脏最高(66.7—81.8％);淋巴结最低(0.0—25.0％);其他脏器的感染菌检出率也有不同程度的差异。     

巴氏碳球C_(60)对体外培养HeLa细胞的光敏杀伤效应

采用MTT比色分析法,观察了不同C_(60)浓度和不同光照强度下C_(60)对体外培养的HeLa细胞的光敏杀伤效应。结果表明,C_(60)在30μg/ml,光强4000Lux的条件下即可杀伤大部分细胞。受伤细胞圆缩、脱壁,里面颗粒增多,失去表面微绒毛状结构。当光强增大时,细胞表面甚至出现破损。     

乙型脑炎病毒NS2A-C60A位点突变对其生物学特性影响研究*

目的:旨在探索Ⅰ型日本乙型脑炎病毒传代致弱后基因组突变NS2A-C60A对乙脑病毒生物学特性的影响。方法:首先通过对传代致弱及原始乙脑毒株基因组序列进行测序比对、结构预测分析并利用Western blotting(WB)确定了目标研究位点NS2A-C60A;然后使用反向遗传定点突变技术构建拯救了包含NS2A-C60A单点突变的病毒株;最后利用噬斑形态观察、生长曲线、双萤光素酶分析,WB以及炎性因子检测和动物实验研究了该单点突变对于乙脑病毒生物学特性的影响。结果:首次研究发现Ⅰ型乙脑病毒传代致弱会导致NS1'蛋白表达的显著下降以及可能的相关位点NS2A-C60A,并成功拯救获得了NS2A-C60A单点突变毒株rJEV-C60A,研究发现NS2A-C60A突变对乙脑病毒的生长特性及噬斑形成没有显著影响,但是能够显著降低乙脑病毒NS1'蛋白的表达,并且该位点突变能够轻微阻碍乙脑病毒对细胞炎性因子表达的抑制,动物实验结果显示NS2A-C60A点突变病毒与原毒株具有相似的神经毒力,说明该位点突变不是影响乙脑病毒毒力致弱的关键位点。结论:新发现的NS2A-C60A位点突变能够显著减少乙脑病毒NS1'蛋白的表达,但是对其增殖、诱导炎症及神经毒力等生物学特性没有显著影响。     

伴刀豆球蛋白A中铽(Ⅲ)和钴(Ⅱ)之间的能量转移——一种新的金属离子之间距离的探针

基于Frster偶极-偶极无辐射能量转移机理估测溶液状态下能量给予体和接受体之间的距离已广泛应用于生物大分子的构象分析中,但仍局限于有机物基团之间的距离测定,Horrocks等人用铽和钴离子作为探针测定了嗜热菌蛋白酶分子内一个钙离子与锌离子之间的距离,测定结果与x-光衍射结果     

根癌病土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒的传递性研究及其在遗传工程中的应用

一、Ti质粒的发现 根癌病土壤杆菌是引起许多植物(据文献记载有83属300余种)冠瘿(crown gall)肿瘤的病原体。有关它的研究是从1907年Smith和Townsend提出该病的病原学开始的,40年代While和Braun等人用无菌冠瘿组织证明肿瘤的发生基于肿瘤基因的转化以后,吸引了越来越多的人去进行这种基因的分离和转化研究。特别是60年代,Schilpcroort等人用免疫学和分子杂交的技术,在无菌冠瘿细胞中分别测到了细菌的抗原和细菌Ti质粒的DNA序列以后,这方面的文章更是指数地增加。     

基于电镜和免疫组化的线粒体数目标志物评估肝癌的初步研究

目的:研究线粒体数目与肝癌生长的相关性。方法:利用电子显微镜技术定量肝癌组织中线粒体数目,利用免疫组织化学技术评估肝癌组织中的线粒体标志物COX Ⅳ及HSP60表达水平,分析电镜肝癌线粒体定量结果与COX Ⅳ及HSP60表达量之间的相关性,并比较肝癌中线粒体数目、COX Ⅳ及HSP60表达量与肝癌直径之间的关系。结果:与癌旁相比,肝癌组织中线粒体数目(P0.001)、COX Ⅳ及HSP60的表达量显著降低(P=0.0417,P=0.0290)。COX Ⅳ及HSP60表达水平与线粒体数目无显著相关(r~2=0.009,P=0.5468;r~2=0.056,P=0.1396)。线粒体数目与肿瘤直径显著负相关(r~2=0.1086,P=0.0434),COX Ⅳ及HSP60表达量与肿瘤直径无显著相关(r~2=0.0251,P=0.3287;r~2=0.0461,P=0.1830)。结论:线粒体数目是潜在的肝癌生长标志物。但常用的线粒体定量分子HSP60与COX Ⅳ并不能准确定量肝癌线粒体。     

Oleanolic Acid Induces Apoptosis in Human Leukemia Cells through Caspase Activation and Poly（ADP-ribose） Polymerase Cleavage

It has been shown that Fructus Ligustri Lucidi （FLL）, a promising traditional Chinese medicine, can inhibit the growth of tumors. However, the effective component and molecular mechanism of FLL act to inhibit tumor proliferation are unclear. In this study, we demonstrated that oleanolic acid （OA）, a principal chemical component of FLL, inhibited the proliferation of human leukemia HL60 cells in culture. MTT assay showed that treatment of HL60 cells with FLL crude extracts or OA dramatically blocked the growth of target tumor cell in a time- and dose-dependent manner. Morphological changes of the nuclei and DNA fragmentation showed that apoptotic cell death occurred in the HL60 cells after treating with FLL extracts （20 mg/ml） or OA （3.65×10^-2 mg/ml）. Furthermore, flow cytometry assay showed that treatment of HL60 cells with FLL or OA caused an increased accumulation of G1 and sub-G1 subpopulations. Western blot analysis showed that caspase-9 and caspase-3 were activated, accompanied by the cleavage of poly （ADP-ribose） polymerase （PARP） in the target cells during FLL- or OA-induced apoptosis, These results suggest that OA acts as the effective component of FLL by exerting its cytotoxicity towards target tumor cells through activation of caspases and cleavage of PARP.     

60Coγ射线辐照处理对枇杷次生枝果实品质性状的影响

探讨了60Coγ射线照射解放钟枇杷枝条,对次生枝果实外观品质和口感品质性状的诱变规律。结果表明:在14.4 Gy~28.8 Gy辐照剂量范围内,对风味品质、果肉颜色、果皮颜色、锈斑、肉质、汁液等有较强的诱变效应(诱变频率0.48%~44.06%);诱变效应为风味>果肉颜色>果皮颜色>肉质>锈斑>汁液,有益诱变效应为:风味>果皮颜色>汁液>肉质;综合比较认为,要改善解放钟枇杷果实外观品质和口感品质,宜选用24.0 Gy左右的辐照剂量。