脉冲电场对真皮成纤维细胞生长和膜流动性的影响

采用MTT比色分析法检测脉冲电场(f=50Hz,t=20μs,Epp=1V/m),对真皮成纤维细胞增殖的影响,结果表明,电场作用1分钟和5分钟,均产生促进细胞增殖的效果(P<0.05和P<0.001),而较长时间(t≥10分钟)的电场作用则显著抑制细胞的正常增殖(P<0.001)。 采用荧光偏振法研究了脉冲电场对真皮成纤维细胞膜流动性的影响。结果表明,电场作用5分钟后即刻引起膜流动性的显著增加。而电场作用45分钟后,需经过一段时间的温育(30 分钟),才表现出膜流动性的降低。说明不同作用时间的电场可以造成膜流动性的增加或降低,而且对膜流动性的影响是可逆的。我们认为,脉冲电场所引起的膜流动性改变是细胞分裂能力发生变化的原因之一。     

关于比色测定中以吸光值的算术值查标准曲线的思考

在植物生理生化实验中 ,光学分析技术是分析测定生化物质的非常重要的实验技术。此种技术是根据生化物质本身或其参与某种化学反应后的生成物有吸收特定光波的特性 ,通过分光光度计(或比色计 )对该生化物质进行测定 ,亦即通常所说的比色测定。在这类实验中 ,普遍的做法是将标准     

木瓜中齐墩果酸测定方法的研究

研究了木瓜中齐墩果酸的比色测定方法,试验证明：用时草醛－高氯酸为显色剂的最佳测定条件为：加入待测试样后,加热挥去溶剂,再加入0．2ml新制的5％香草醛冰醋酸液及0．8ml高氯酸试剂,在70℃恒温水浴加热15min,冷却加入4ml乙酸乙酯,摇匀,在λ=560nm处测定。该法操作简单,灵敏度高且比较准确。     

MEKK3稳定表达细胞株的建立及其对A549细胞增殖的影响

目的 构建人MEKK3基因编码区序列（cDNA）的真核表达载体、建立其稳定表达细胞株并观察其对肺腺癌细胞增殖的影响.方法 从A549细胞中提取总RNA,应用RT-PCR扩增MEKK3 cDNA的全长序列后克隆入pcDNA3.1/hygro（＋）质粒中,构建成MEKK3基因的真核表达载体,然后转染入人肺腺癌A549细胞中,潮霉素筛选稳定转染克隆,通过MTT实验,研究转染MEKK3基因前后细胞增殖的变化.结果 重组载体经酶切鉴定和测序证实目的 基因正确无误,Western印迹检测结果显示MEKK3基因在A549细胞中具有良好的表达;荧光实时定量PCR结果表明MEKK3基因在其稳定转染的A549细胞克隆中表达上调,与空载体稳定转染及未转染细胞比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）;MTT结果显示MEKK3表达上调的稳定克隆组,A549细胞的增殖活性显著增强（A570=0.876 1±0.074 5）,明显高于空载体稳定转染组（A570=0.582 8±0.070 3）及未转染亲代细胞组（A570=0.584 9±0.035 2）,差异具有统计学意义（P＜0.01）,而后两者之间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 MEKK3表达上调可导致肺腺癌细胞的增殖增强.     

巨噬细胞源性神经营养因子的纯化和鉴定

应用Sephacryl S-100-HR凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)和反相高效液相色谱(R-HPLC)分析,从巨噬细胞条件培养基中纯化了巨噬细胞源性神经营养因子(MΦDNF)。该因子在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现一条单一蛋白带,其分子量为60.5kD,等电点约5.1。其氨基酸组成含有较高比例的天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸。纯化的MΦDNF能支持体外培养的小脑皮质神经元的存活,增强其活性及促进神经元突起的生长。其最大效应浓度为500—1000ng/ml。     

動物體內碘的微量測定法

关于动物体内碘含量之测定法,历来文獻甚为繁多。然其原理大体皆甚相似,不外将有机结合的碘分解,自杂质中分离、氧化之使成碘酸,更与另加之碘化钾相作用以释出元素碘,而後以澱粉为指示剂,或滴定、或比色,藉以计算出原有之碘量为若干。此法经许多学者之逐渐改良,已成为颇精确之测定法。但因受其靈敏度之限     

Transgelin基因真核表达载体的构建及其对胃腺癌AGS细胞增殖的影响

目的 构建人肌动蛋白凝胶蛋白（Transgelin）基因编码区序列（cDNA）的真核表达载体,并观察其对胃腺癌细胞增殖的影响.方法 从健康人肠组织中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增TransgelincDNA的全长序列后克隆入pcDNA3.1/myc-His（-）A质粒中,构建成Transgelin基因的真核表达载体,然后转染入AGS细胞中,新霉素筛选稳定转染细胞克隆,通过MTT实验,研究转染Transgelin基因后细胞增殖的变化.结果 重组载体经酶切鉴定和测序证实目的 基因正确尤误,Western印迹检测结果显示Transgelin融合蛋白在AGS细胞中具有良好的表达,而转染空载体及未转染细胞对照则未见有此融合蛋白质条带;RT-PCR结果显示Transgelin基因在其稳定转染的AGS细胞克隆中表达上调,与空载体稳定转染及未转染细胞比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）.Transgelin表达上调的稳定克隆组,AGS细胞的增殖活性明显降低,MTT结果显示其增殖活性显著低于空载体稳定转染组及未转染亲代细胞组,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而后两者之间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 Transselin表达上调可导致胃腺癌细胞增殖降低.     

功能化GNPs在流行病快速检测和实体医疗中的应用

金纳米粒子(gold nanoparticles, GNPs)与不同分子偶联,不仅可优化其存储条件,还可起放大信号的功能。GNPs是种理想的偶联体,其生物相容性、低毒性、稳定性和表面功能化等特性使其应用具有极强的可塑性。功能化的GNPs为构建体外诊断产品提供了载具基础,在流行病肆虐前期,成熟完善的体外检测方法可提供快速实用和操作便捷的医疗检测。该文就功能化GNPs检测在流行病及医疗诊断中的应用进展进行综述,以期为体外检测和可视化检测等提供借鉴。     

胃癌细胞对化疗药物的敏感性及其与Pgp、GST-π和Topo Ⅱ表达的关系

目的探讨胃癌在体外对化疗药物的敏感性和与P-糖蛋白(P-glycoprotein Pgp)、谷胱甘肽S转移酶π(glutathione-S-transferase GST-π)和拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ TopoⅡ)表达的关系。方法收集81例手术切除胃癌标本,制备单细胞悬液,分别加入HCPT、CDDP、ADM、5-Fu和MMC培养48h,用MTT比色法检测胃癌细胞对化疗药物的敏感性;免疫组化技术检测Pgp、GST-π和TopoⅡ蛋白在胃癌组织中的表达。结果胃癌细胞对不同化疗药物敏感性不同:5-Fu(43.4±9.2)、CDDP(41.9±8.7)和HCPT(40.6±8.3)对胃癌细胞的抑制率与ADM(31.6±7.8)和MMC(28.7±7.3)比较有统计学意义(P0.05)。胃癌组织中Pgp、GST-π和TopoⅡ蛋白的阳性率分别为61.33%、65.33%和68.00%。Pgp阳性者显示对ADM、HCPT有明显的体外耐药性(P0.05),GST-π在5-Fu、CDDP和MMC耐药组阳性率显著高于敏感组(P0.05),而TopoⅡ在HCPT、ADM和MMC耐药组中的表达显著低于敏感组(P0.05)。结论 Pgp、GST-π和TopoⅡ可以作为胃癌对化疗药物原发性耐药的标志,结合MTT药敏检测,有助于筛选有效化疗药物。     

苦参植株中总生物碱的分布及含量测定

选用酸性染料络合显色法测定了江苏盱眙产苦参的根、茎、叶、种子等部位中苦参总碱的含量 ,为充分利用苦参全植株提供了一定的依据。