视黄醇结合蛋白的结构与功能

视黄醇结合蛋白（RBP）是视黄醇转运的载体蛋白,作为结合小分子流水物质的载体蛋白家族（lipocalin）的一个重要成员,其结构与功能的研究正受到国外学者的重视,文章介绍了视黄醇结合蛋白的性质、结构研究进展,讨论了视黄醇结合蛋白与前蛋白和受体相互作用的位点和结构特点．     

尿微量蛋白与尿酶联合检测在早期肾脏损害诊断中的临床应用价值

目的:探讨尿微量蛋白与尿酶联合检测在早期肾脏损害诊断中的临床应用价值。方法:尿微量白蛋白(mALB)、视黄醇结合蛋白(RBP)采用免疫透射比浊法测定;尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)采用终点法测定,尿肌酐(Cr)采用肌氨酸氧化酶法测定。结果:①尿蛋白定性为阴性的高血压、糖尿病、系统性红斑狼疮患者(尿蛋白阴性组)尿mALB/Cr、RBP/Cr、NAG/Cr显著高于正常对照组,两组比较差异具有统计学意义(P均<0.05)。尿蛋白定性为阳性的高血压、糖尿病、系统性红斑狼疮患者(尿蛋白阳性组)尿mALB/Cr、RBP/Cr、NAG/Cr显著高于阴性组,两组比较差异具有统计学意义(P均<0.05)。②应用单个指标或任意两个指标联合诊断早期肾损害的灵敏度较低,应用3个指标联合诊断早期肾损害的灵敏度达到86.30%。结论:尿mALB、RBP、NAG联合检测可以早期、可靠地诊断肾脏损害。     

胶体金免疫层析法视黄醇结合蛋白检测试剂对肾小管功能损伤的诊断价值评价

目的:对胶体金免疫层析法的视黄醇结合蛋白(RBP)检测试剂诊断肾小管损伤的价值进行评价。方法:选择上海柏纳生物技术有限公司生产的视黄醇结合蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法)与上海太阳生物技术有限公司生产的RBP含量测定试剂盒(酶联免疫法)进行对比试验,分别对临床选取的病例组和对照组的尿液样本进行检测。参考临床单位诊断标准,酶联免疫法结果浓度≥300ng/mL为阳性,<300ng/mL为阴性;胶体金免疫层析法检测结果检测线显色为阳性,不显色为阴性。对两组检验结果进行Kappa一致性检验,分析两种检测方法诊断结果的一致性,同时以临床通用诊断方法为参考,计算胶体金免疫层析法诊断肾小管功能损伤的灵敏度和特异度。结果:两种检测方法的诊断结果一致性良好(市一医院:K=0.9070,95%CI:0.8277～0.9863,P<0.01;市六医院:K=0.9391,95%CI:0.8714～1.000,P<0.01)。胶体金方法诊断肾小管损伤的灵敏度和特异度,市一医院:灵敏度=100%,精确95%CI为:92.45%～100.00%;特异度=91.80%,精确95%CI为:81.90%～97.28%;市六医院:灵敏度=100%,精确95%CI为:91.40%～100.00%;特异度=95.00%,精确95%CI为:86.08%～98.96%。结论:胶体金免疫层析法的视黄醇结合蛋白检测试剂与已批准上市的试剂等效,对肾小管功能损伤的诊断具有重大应用价值。     

血清视黄醇结合蛋白-4同儿童肥胖和代谢综合征组分的关系

目的:探讨儿童血清视黄醇结合蛋白-4(retinol-binding protein4,RBP-4),视黄醇,甲状腺素运载蛋白(transthyretin,TTR)等维生素A相关指标与肥胖、胰岛素抵抗以及代谢综合征组分之间的关系。方法:分别随机选取本地区13-15岁体检学生,其中正常对照组和单纯性肥胖组儿童各50例,测定其血清RBP-4、视黄醇、TTR水平;利用空腹胰岛素和定量胰岛索敏感性检测指标评价其胰岛素抵抗;同时测定代谢综合征部分组分水平和亚临床炎症指标。结果:仅5%的青少年存在维生素A营养不足状态。排除年龄、性别、感染等因素的影响后,血清RBP-4水平、视黄醇、RBP-4/TTR摩尔比值以及RBP-4/视黄醇摩尔比值与体重指数、体脂含量以及体脂的中心分布(WHR)等密切相关;RBP-4与代谢综合征组分的甘油三酯水平则存在明显的正相关,而RBP-4/视黄醇摩尔比值则与空腹胰岛素水平存在显著的正相关。结论:RBP-4可能通过视黄醇依赖和/或非视黄醇依赖的方式参与肥胖和代谢综合征的病理过程。     

高效液相色谱法同时测定儿童血清中视黄醇、25-OH-维生素D3和α-生育酚浓度

目的:建立能同时测定儿童血清中视黄醇、25-OH-维生素D3和a-生育酚的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法.方法:以无水乙醇沉淀蛋白质后,血清中的脂溶性维生素用正己烷提取,吹氮气浓缩后用HPLC测定.结果:视黄醇、25-OH-维生素D3和a-生育酚的线性范围分别为0.015-500μg/mL、0.012-500μg/mL和0.1-500 μg/mL;检出限分别为0.015μg/mL、0.012μg/mL和0.1μg/mL;相对标准偏差分别为0.98%、2.09%和4.63%.三种脂溶性维生素各个浓度的提取回收率均大于80%,方法回收率均大于90%.结论:本法简便快速,适于血清样品中视黄醇、25-OH-维生素D3和a-生育酚三种脂溶性维生素的同时测定.     

大肠杆菌FC40系统静止期突变中的F因子转移

本研究采用大肠杆菌GM133 rifr细胞和营养收集细胞HB214 strr进行适应性突变实验。在混合30min和2d 后添加链霉素杀死GM133基因型细胞,继续培养5d后,在选择平板上出现了一定数量的lac+strr基因型回复突变菌落。根据这些突变菌落的数量,估计在lac+突变产生之前,GM133和HB214细胞之间的接合频率分别为0.07%和7.47%。在培养了7d的选择平板上添加含链霉素的M9选择培养基,2d 后也观察到大量发生lac+突变但没有形成肉眼可见菌落的营养收集细胞。此外,在lac+突变发生后,也有F因子从GM133细胞转移进入HB214细胞。这些事实表明,在FC40系统的适应性突变实验中发生了真正的F因子转移。 Abstract:The experiment of adaptive mutation was performed by using Escherichia coli GM133 rifr as test cells and HB214 strr as scavenger cells.Transfer frequency between GM133 and HB214 was estimated,based on the number of revertants appeared on the selective plates when GM133 were killed by addition of M9 selective medium containing 100μg/mL of streptomycin at different time.After 30 minutes the cells of GM133 and HB214 were mixed,the estimated transfer frequency was about 0.07%,and two days,7.47%.After selection of 7 days,some HB214 cells with F` factor from GM133 cells and lac+ mutation were observed,but these cells failed to form the colonies which can be seen by the naked-eye.It was demonstrated that actual F` factor transfer events from test cells GM133 to scavenger cells HB214 occurred during the selection.     

一种新的短链脱氢/还原酶家族新成员:NADP(H)-依赖的视黄醇脱氢酶基因的克隆和分析

从牛的肝脏中快速抽提总RNA,根据GenBank已发表NADP(H)-依赖的视黄醇脱氢酶基因(NRDR)的cDNA序列,设计并合成特异引物,利用cDNA末端快速扩增(RACE)方法和反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),得到牛肝内的NRDR cDNA的全长序列。经测序证实,牛肝NRDR的全长cDNA序列为1266bp,其开放读码框架在24～806bp,编码260个氨基酸(GenBank登录号：AF487454)。根据NRDR基因推导出的氨基酸序列与人、鼠、兔有高度同源性,并含有SDR超家族成员的两个高度保守的模序,在其C-端含有过氧化物酶体的靶向序列为SHL。结果表明,牛的NRDR应属于过氧化物酶体内SDR超家族成员并在维甲酸合成的限速步骤起作用的酶,也为维甲酸合成的传统通路提供一个补充。     

视黄醇结合蛋白的分子生物学

视黄醇结合蛋白 (RBP)是维生素A(VitA)的运载蛋白 ,结构上为疏水小分子结合蛋白家族的成员。视黄醇结合蛋白在肝脏中合成并释放入血液后 ,通过与视黄醇 (ROH)、甲状腺素运载蛋白 (TTR)及细胞表面受体相互作用 ,在VitA的储存、代谢、转运到周围靶器官中发挥重要功能。本文从基因结构与表达、构效关系及临床意义等方面介绍了视黄醇结合蛋白的分子生物学。     

视黄醇结合蛋白4在非酒精性脂肪肝病大鼠组织中的表达

目的：视黄醇结合蛋白4（RBP4）在非酒精性肝脂肪变模型大鼠中的表达情况,以探求其在疾病发生、发展中的意义。方法：40只wistar大鼠随机分为对照组和造模组,分析各组在2、4、6、8周4个时间点血清ALT、AST、TG、TC的变化及肝组织RBP4的表达情况。结果：随着造模时间延长,造模组大鼠肝脏脂肪变越来越明显,血清ALT、AST、TG、TC逐渐升高（p〈0.05）。造模组肝组织RBP4的mRNA的表达随造模时间逐渐增强;造模组免疫组化结果发现,RBP4的表达随造模时间逐渐增强（p〈0.05）。结论：在大鼠非酒精性脂肪肝模型中,RBP4的表达随造模时间延长而增加,与同期对照组相比有统计学差异,因此RBP4可能作为一个敏感的指标反映非酒精性脂肪肝的发生及发展情况。     

视黄醇转运的分子机制

本文从视黄醇（维生素Ａ）的载体蛋白（ＲＢＰ０在内醇转运中的作用和结构特点,结合内醇的ＲＢＰ与前白蛋白（ＴＴＰ）的作用,视黄醇的转运及膜受体的性质等方面介绍视黄醇转运到靶细胞的分子机制。