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溶于NaI的信使RNA(mRNA)将吸附在硝酸纤维素膜上。在低温下,核糖RNA、天然DNA和变性DNA的结合是很少的。固定的mRNA使用于分子杂交,并可被翻译成蛋白质,或反转录成DNA。 相似文献
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本文采集并分析了苏云金杆菌Bacillus thuringiensis发酵后处理技术,揭示了Bt发酵后处理生产膜过滤数据分析、喷雾干燥数据分析和产量的关系,以期对Bt实际生产过程进行高效控制。 相似文献
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提高成纤维细胞生长因子-21产率和纯度 总被引:1,自引:1,他引:0
成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)作为近期发现的新型代谢调节因子,因其具有独立于胰岛素调节糖脂代谢、增加胰岛素敏感性等作用,有望成为治疗糖尿病的新型药物。包涵体形式表达外源蛋白表达量及纯度高,但是以pET载体表达时,FGF-21以包涵体形式表达,且复性率及产率低,蛋白活性降低[1]。针对这一瓶颈问题,用SUMO载体首次以包涵体形式表达带有SUMO标签的hFGF-21,通过优化培养条件,并应用中空纤维柱膜过滤技术对菌体进行富集,对包涵体进行洗涤、变性及复性,经过亲和层析、凝胶过滤层析的纯化方法,得到了成熟的hFGF-21,在保证蛋白活性的同时增加了蛋白的产量及纯度。通过检测HepG2细胞葡萄糖吸收及2型糖尿病db/db小鼠短期及长期血糖变化鉴定其降糖生物学活性。结果表明,以包涵体形式表达hFGF-21(ihFGF-21)的表达量是可溶形式表达的hFGF-21(shFGF-21)的3倍,最终ihFGF-21的收率为20 mg/L,而shFGF-21的收率仅为6 mg/L。ihFGF-21的纯度可达到95%以上,而shFGF-21仅能达到90%左右;在细胞水平和动物水平上两者的降糖生物学活性一致。在保证hFGF-21生物学活性的前提下,与传统包涵体途径提取目的蛋白的方法相比,应用中空纤维柱膜过滤技术使hFGF-21的生产周期缩短了约1/3左右。综上所述,此法为FGF-21中试及工业化生产提供了高效、经济的策略。 相似文献
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苏云金芽孢杆菌增效物质回收工艺的改进 总被引:2,自引:0,他引:2
应用膜过滤技术对苏云金芽孢杆菌KN11增效物质回收工艺进行了改进,发现纳滤膜(200D)能完全截留KN11增效物质,通过3种膜过滤(0.1μm微滤膜、10000D超滤膜和200D纳滤膜)的总回收率达到85.5%;与常规回收比较,膜过滤回收工艺能显著提高浓缩液和粉的增效物质含量(分别为99.35U/mL,457.70U/g),同时除去了大部分的糖、氮等可溶性杂质,使浓缩液和粉保持了较好的理化性状。所配制的Bt高含量悬乳剂的效价在15645~19465IU/μL之间,含固量较低且流动性较好,Bt高含量原粉效价可达100646IU/mg。 相似文献
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