血管紧张素Ⅱ对肾上腺糖皮质激素分泌的影响

本工作观察了血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）对豚鼠和狗的肾上组织皮质醇分泌量的影响。结果表明,当ＡⅡ浓度≥１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ时孵育液中皮质醇含量显著增加（Ｐ〈０．０１）,并且具有较明显的量效关系和时效关系。ＡⅡ以及促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）与肾上腺组织或细胞一同孵育时,皮质醇的分泌量明显高于ＡⅡ和ＡＣＴＨ单独存在时的分泌量（Ｐ〈０．０５）。孵育液内游离钙减少时ＡⅡ促皮质醇分泌的作用有所降低（Ｐ〈０．０５）     

促胰岛素分泌肽融合蛋白对2型糖尿病小鼠模型的降糖研究

目的 研究促胰岛素分泌肽融合蛋白(glucagon-like peptide fusion protein,简称E4F4)皮下给药对2型糖尿病小鼠的降糖作用,评价E4F4的降糖效果,为该蛋白的进一步研究提供依据。方法 选取雄性C57BL/6小鼠,采用高脂饲料联合腹腔注射低剂量链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)的方法,构建2型糖尿病小鼠模型,随机分为模型对照组和E4F4高(500μg/kg)、中(250μg/kg)、低剂量(125μg/kg)组。药物干预后,测量小鼠体质量和摄食量的变化,测定随机和空腹血糖。2周给药结束后,进行口服葡萄糖耐量试验,并测定血清胰岛素水平及附睾脂肪含量。结果 E4F4给药2周,各剂量组小鼠随机体质量在3 d时降幅最大,9～10 d开始恢复至基线值水平;高、中、低剂量组小鼠平均每日摄食量分别为4.8、5.2和5.5 g,均低于模型对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);高、中、低剂量组随机血糖与模型对照组相比平均下降率分别为25.2%、20.3%和16.9%,空腹血糖与模型对照组相比平均下降率分别为44.3%、42.1%和38.7%...     

支链氨基酸及代谢中间产物对胰岛素抵抗的调控及其机制

支链氨基酸作为必需氨基酸,可用于合成含氮化合物,也可充当信号分子调节物质代谢。研究表明,支链氨基酸水平升高与胰岛素抵抗和2型糖尿病发生密切相关,其可通过激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路来影响胰岛素信号转导,还可通过损害脂质代谢和影响线粒体功能来调控胰岛素抵抗。此外,支链氨基酸分解代谢异常会导致代谢中间产物(如支链α-酮酸、3-羟基异丁酸和β-氨基异丁酸等)积累,其中支链α-酮酸和3-羟基异丁酸可通过影响胰岛素信号通路、损害脂质代谢等来诱发胰岛素抵抗,而β-氨基异丁酸可通过减少脂质积聚和炎症反应、增强脂肪酸氧化等来改善胰岛素抵抗。本文系统综述了支链氨基酸及其代谢中间产物对胰岛素抵抗的影响及调控机制,以期为胰岛素抵抗和2型糖尿病的防治提供新方向。     

靶向蛋白质泛素修饰及降解在前列腺癌治疗中的机遇与挑战

前列腺癌是中国发病率增长最快的男性肿瘤,抗雄激素治疗耐药是导致前列腺癌患者预后差的主要原因。因此,解决耐药性难题是前列腺癌转化研究的关键问题。哺乳动物细胞利用泛素-蛋白酶体系统实现蛋白质的靶向降解。因此,前列腺癌中关键的癌基因如雄激素受体（AR）的上游泛素化调控因子（如去泛素化酶）是潜在的治疗靶点。然而,这些酶具有较广的底物谱系,存在脱靶的可能性。近来,基于泛素-蛋白酶体系统开发的蛋白质降解靶向嵌合体（proteolysis-targeting chimeras,PROTAC）技术是最具前景和革命性的新型抗癌药物研发技术,能够利用特定E3泛素连接酶对靶蛋白进行降解而不影响其他底物。与传统小分子抑制剂相比,PROTAC分子在克服耐药性以及针对不可成药的靶点方面拥有巨大优势。目前,针对AR的PROTAC降解剂已在II期临床取得了成功,靶向蛋白质泛素化及降解途径的新技术将有望为前列腺癌的临床治疗带来新的突破。     

糖皮质激素及其他甾体激素对大鼠下丘脑薄片释放精氨酸加压素的影响

本工作采用离体孵育技术,观察大鼠下丘脑薄片（含有室旁核和视上核）释放精氨酸加压素（ＡＶＰ）和糖皮质激素（ＧＣ）及其他甾体激素对ＡＶＰ释放的快速影响。结果如下：（１）大鼠下丘脑薄片经过９０ｍｉｎ的恢复之后,在长达６ｈ的孵育过程中能够相当稳定地释放ＡＶＰ,释放量为９．０６±１．２３ｐｇ／ｍｉｎ;（２）皮质酮（Ｂ）在２０ｍｉｎ内可明显地抑制ＡＶＰ的释放,在１０－７—１０－４ｍｏｌ／Ｌ范围内呈剂量－效应关系;（３）在同一剂量（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）,皮质醇、１７β－雌二醇和睾丸酮也可快速地抑制ＡＶＰ的释放,而相同剂量的地塞米松、醛固酮、孕酮、ＲＵ４８６和胆固醇却无此效应;（４）ＲＵ４８６（１０－７—１０－３ｍｏｌ／Ｌ）对ＡＶＰ的释放没有影响,但却能（１０－５—１０－３ｍｏｌ／Ｌ）部分地阻断Ｂ的快速抑制效应。这些结果表明,ＧＣ对大鼠下丘脑ＡＶＰ的释放具有不通过传统的基因组机制的快速抑制效应,此种抑制效应可能与ＧＣ的负反馈调节作用有关。     

人生长激素基因在小鼠细胞中的调节表达

我们已经提过,在人生长激素基因周围是否存在着一些序列,它们使生长激素基因可以被糖皮质激素所诱导。用同转化法将含有人生长激素基因的重纽克隆引入鼠成纤维细胞染色体,在有糖皮质激素存在下,同转化体可被诱导出8到5倍的人生长激素mRNA,对人生长激素蛋白的分泌也有相似的诱导。诱导所需的DNA序列位于DNA5’端,有500个核苷酸。把该DNA6’端片段融合到一个非激素敏感基因的结构基因中,例如胸苷激酶,可使该基因对糖皮质激素的诱导产生反应。     

单克隆抗体检测糖皮质激素受体的方法

利用两种糖皮质激素受体(GR)的单克隆抗体(Mab)建立了免疫活性糖皮质激素受体(GR_1R)的ELlSA检测法。5只大鼠肝胞液GR_1R/mg蛋白为1.0875±0.0257(扫描值)。本法特异性好,适用于没有GR纯品,而Mab数量不多条件下GR_1R的检测,其原理也适用于其他受体蛋白的测定。