虾青素对超低温冷冻大黄鱼精子具有细胞膜保护作用

为研究虾青素对冷冻损伤的大黄鱼精子细胞的保护作用,探讨其内在机制,我们将大黄鱼精子稀释于含10%二甲基亚砜和各浓度虾青素的冷冻稀释液中,冷冻并解冻后,显微镜观察发现,1.43×10-4mol/L的虾青素使大黄鱼精子寿命、运动时间和激活率分别增加13.8%、36.0%和5.5%,接近于鲜精;单细胞凝胶电泳显示,核DNA受损程度明显减少,彗星拖尾变短;流式细胞术结果显示,质膜和线粒体明显受到保护,线粒体质量提高了19.27%(P<0.05)。通过双层类脂膜法测定不同浓度虾青素对H+的传递能力,发现2%的虾青素能较高效率地传递H+。结果表明适当浓度的虾青素能通过传递H+维持线粒体功能,从而保护冷冻损伤的大黄鱼精细胞。     

山羊精子发生不同阶段的显微与超微结构观察

应用光镜和透射电镜技术研究山羊精子发生不同阶段各级生精细胞显微、超微结构及山羊精子分化成熟过程。结果表明：山羊精子发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞及变态精子阶段发育成成熟的精子。精原细胞期核呈椭圆形,染色质凝集成团分布于核质中,线粒体开始出现;精母细胞期有高尔基体分布;精子细胞经过核质浓缩、线粒体迁移等过程发育成成熟精子,成熟的山羊精子头部细长,核质高度浓缩,中段膨大,线粒体丰富。线粒体、中心粒对精子变态发生起重要作用,同时观察到头部与中段脱落的畸形精子。     

小鼠球形精子细胞带下受精研究

试验选用电融合法研究小鼠睾丸球形精子细胞带下受精及糖核在卵胞质内的变化规律,结果表明.以DC:3700～3800V/cm,25μs的电场强度,在此前后各维持1MHz,50V/cm的交流电,是球形精子细胞-卵母细胞对(RS-O)融合的理想电场强度,总存活率、融合率和2PN发育率分别为89.0%(575/646),61.9%(356/575)和49.2%(175/356).电融合液中Ca ²⁺浓度对RS-O的存活率、融合率和发育率均无显著影响.注射hCG后14～16h的卵母细胞构建的RS-O的2PN发育率显著高于其它卵龄组.精核在融合后0～4h,其体积无明显变化,致密度逐渐降低,无明显的核仁形成;4～8h后,32.6%(57/175)的精核膨大形成与雌原核相近大小的雄原核;67.4%(118/17)的精核不能充分膨大,形成较小的雄原核,但其可与雌原核结合.192枚受精卵移植后,共产仔鼠12只(世界第2批),产仔率为6.3%(12/192).     

绵羊tnp2基因的克隆及其在体外共培养系统中圆形精子细胞的转录分析

过渡蛋白2基因（tnp2）是圆形精子细胞特异表达的基因。为了开展绵羊圆形精子细胞标记基因的研究,根据GenBank上已公布的牛的cDNA序列设计引物,采用RT-PCR和分子克隆方法,克隆了蒙古绵羊tnp2基因cDNA部分编码区序列。DNA 序列测定结果与牛的核苷酸序列比对,同源性为95.3%。根据绵羊tnp2基因的cDNA序列设计引物,对共培养的四月龄绵羊睾丸生殖细胞进行RT-PCR鉴定。结果显示体外共培养的绵羊睾丸生殖细胞一直到第十周后仍有圆形精子细胞产生。绵羊tnp2基因的cDNA克隆和序列测定为进一步研究绵羊精子发生过程奠定了基础。     

大鼠精核蛋白的纯化

用大鼠睾丸制备长形精子细胞核及用附睾制备的附睾精子核,用盐酸胍法提取总碱性蛋白（Ｔｏｔａｌ　ｂａｓｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ,ＴＢＰ）。通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１００分子筛层析,其第三峰用５％ＴＣＡ沉淀,得到纯大鼠精核蛋白（Ｒａｔ　ｐｒｏｔａｍｉｎｅ,ＲＰ）。ＲＰ也可用ＴＢＰ通过ＨＰＬＣ反相柱得到纯化,ＲＰ位于２６％－２８％乙腈梯度。     

混合斑中精子细胞分离方法的应用研究进展

性侵犯案件中精阴混合斑的分离一直是法庭科学物证检验中的难点.现依据分离原理的不同,将各种精子细胞分离方法分为非免疫学方法与免疫学方法,同时对各方法的优缺点进行概述,进而总结精子细胞分离方法的研究进展,并对其应用前景作了进一步的分析与展望。     

银杏精子细胞生毛体及其它细胞器的超微结构

生毛体与嗜锇颗粒是银杏 (Ginkgobiloba)精子细胞中最具有标志性的结构。生毛体是细胞质内一直径为 3～ 4μm的圆球形结构 ,它由一个电子致密的核心和由此向周边发散出的辐射状中心粒组成 ,致密核心上具有微管结构的弱电子染色区域 ,并有微管从生毛体延伸到细胞质。嗜锇颗粒直径为 1 0～ 2 0μm,呈圆球状 ,位于生毛体和细胞核之间 ,其相对的另一侧存在纤维颗粒体。在精子细胞质内 ,特别是嗜锇颗粒和生毛体周围线粒体、质体、内质网、高尔基体等细胞器丰富。银杏精子细胞核较大 ,在细胞核内 ,核仁结构呈球形 ,电子染色致密的颗粒区在周围 ,而纤维组分则在圆球的中间。在核膜表面布满了分布不均匀的核孔复合体。     

科研快讯

《PLoS综合》:视黄醇类物质转运蛋白结合机制差异研究获进展近日,中科院昆明动物研究所黄京飞课题组张玉茹博士和赵玉琦博士运用生物信息学和分子动力学模拟的方法,详尽解释了这种生     

Expression and Identification of a Novel Apoptosis Gene Spata17 （MSRG-11） in Mouse Spermatogenic Cells

In this study,anti-spermatogenesis-associated 17 (Spatal7) polyclonal antibody was preparedby immunizing New Zealand white rabbits with a synthesized peptide corresponding to the amino acid se-quence 7-23 of the mouse Spata17 protein.Immunohistochemical analysis revealed that Spata17 proteinwas most abundant in the cytoplasm of round spermatids and elongating spermatids within seminiferoustubules of the adult testis.The expression of Spata17 mRNA in cultured mouse spermatogonia (GC-1) cellswas almost undetectable.In an experimental unilateral cryptorchidism model of an adult mouse,the expres-sion of Spata17 mRNA had no obvious difference with the normal testis until postoperation day 1,butgradually decreased from day 3 and was almost undetectable on day 17.Immunohistochemical analysisrevealed that the protein was almost undetectable within seminiferous tubules of an experimental unilateralcryptorchidism model of the adult testis on postoperation day 8.Flow cytometry analysis showed that theexpression of Spatal7 protein in the GC-1 cell line could accelerate GC-1 cell apoptosis.The effect increaseswith the increasing of the transfected dose of pcDNA3.1 (-)/Spata17.By Hoechst 33258 staining,a classicalway of identifying apoptotic cells,we further confirmed that the apoptosis was induced by expression ofSpata17 in transfected GC-1 cells.