全文获取类型
收费全文 | 442篇 |
免费 | 13篇 |
国内免费 | 134篇 |
出版年
2024年 | 1篇 |
2023年 | 7篇 |
2022年 | 8篇 |
2021年 | 8篇 |
2020年 | 6篇 |
2019年 | 11篇 |
2018年 | 3篇 |
2017年 | 6篇 |
2016年 | 13篇 |
2015年 | 3篇 |
2014年 | 15篇 |
2013年 | 13篇 |
2012年 | 19篇 |
2011年 | 11篇 |
2010年 | 15篇 |
2009年 | 11篇 |
2008年 | 32篇 |
2007年 | 9篇 |
2006年 | 17篇 |
2005年 | 14篇 |
2004年 | 26篇 |
2003年 | 25篇 |
2002年 | 24篇 |
2001年 | 22篇 |
2000年 | 25篇 |
1999年 | 28篇 |
1998年 | 25篇 |
1997年 | 16篇 |
1996年 | 22篇 |
1995年 | 24篇 |
1994年 | 19篇 |
1993年 | 27篇 |
1992年 | 17篇 |
1991年 | 17篇 |
1990年 | 15篇 |
1989年 | 13篇 |
1988年 | 4篇 |
1987年 | 7篇 |
1986年 | 4篇 |
1985年 | 3篇 |
1984年 | 1篇 |
1983年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
1957年 | 1篇 |
排序方式: 共有589条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
本文报道了将欧洲流行的口蹄疫病毒O1-K亚型的主要表面抗原VP,克隆插入痘苗病毒的TK基因中,并在动物细胞中表达。所用痘苗病毒载体为我国长期用于防治天花的痘苗病毒效果安全的天坛株,所用O1K亚型VPl克隆为Hofschneider,P.H.教授惠赠的pFMDV-1034。首先将pFMDv一1034中的VP1基因片段插入中间质粒pBCB06的BamHI/Hind I位点,该质粒含痘苗病毒WR株的P7.5;启动子和多克隆位点,其两侧序列为TK基因(由D.Boyle博士赠)。或插八pBcB08的Hind I位点,该质粒与pBcB06。之区别仅在于启动子为PL11、多克隆位点种类不同。将杂合的中间质粒转化已由天坛株痘苗病毒TK+侵染过的143BTK-细胞,通过体内同源重组而获得有VP,基因插八的重组痘苗病毒。在BUDR存在时不能侵染143BTK-细胞的病毒可视为TK-表型病毒即含VP1基因的痘苗重组病毒,再经pFMDV—1034BamHI-Hind I片段为探针进行杂交确证。其中所得两株重组痘苗病毒V.V10344H、V.V103408在143B TK-细胞中繁殖并用ELIsA方法测表达,其P/N值最高分别为9.50和8.21。 相似文献
2.
3.
4.
5.
6.
7.
用重组痘苗病毒表达pGHcDNA的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
构建了含有pGHcDNA的重组痘苗病毒,用ELISA证明该重组病毒在被感染的h143细胞中,可表达出猪生长激素并将之分泌到培养基中,表达量约为1.05μg/10^6细胞(24h),用定位免疫化学法进一步证明该病毒可感染小鼠并在小鼠体内表达pGHcDNA,同时还构建了含双拷贝pGHcDNA的重组痘苗病毒,并证明其pGH表达量比单拷贝重组病毒有明显提高,约为1.50μg/10^6细胞(24h) 相似文献
8.
9.
利用PCR方法对单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2gD)基因进行了修饰,在其5'端删去约500bp的非编码区,仅保留ATG上游7个bp。将修饰后的HSV-2gD基因插入到带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的痘苗表达质粒pJSA1175,置于痘苗病毒P7.5k早/晚期启动子控制下。将此重组质粒用脂质体Lipofectin方法转染已受野型TK ̄+痘苗病毒天坛株感染的TK ̄-143细胞,通过同源重组机制和标志基因LacZ产物的蓝斑显色作用,以及BudR试剂对TK表型的选择压力,筛选出整合有HSV-2gD基因的重组痘苗病毒。Southem杂交表明,HSV-2gD基因已正确地插入痘苗病毒TK基因区内;间接免疫荧光检测显示,HSV-2gD蛋白已得到有效表达,且主要分布于细胞膜。重组病毒免疫家兔可产生明显的抗HSV-2gD中和抗体。用重组病毒免疫小鼠,3周后可使94%(17/18)的小鼠对抗HSV-2的致死量攻击,表明重组病毒具有明显的免疫保护作用。 相似文献
10.
狂犬病毒G蛋白和N蛋白在痘苗病毒天坛株中共同表达 总被引:6,自引:0,他引:6
本文构建了一个能同时表达狂犬病毒糖蛋白(G)和核蛋白(N)两种蛋白的重组组痘苗病毒。用Southern blot和免疫荧光等方法证明G和N基因已重组到痘苗病毒TK基因区,而且能良好地表达。并证明该重组病毒在小鼠中具有良好的免疫效果。 相似文献