奥利司他逆转肺腺癌A549/DDP细胞株顺铂耐药及机制研究

本研究的目的是观察奥利司他(Orlistat)逆转肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP的耐药作用并考察其可能的分子机制。应用CCK-8法检测并计算肺腺癌耐药细胞株A549/DDP对顺铂(cisplatin, DDP)的耐药指数(resistance index, RI),筛选奥利司他的最佳实验浓度并观察其对A549/DDP细胞的耐药逆转效果;倒置荧光显微镜下观察各实验组细胞的形态学变化及Hoechst 33258荧光染色后细胞凋亡形态学改变;采用流式细胞术检测不同药物处理对细胞凋亡率的影响;Western blotting检测各实验组细胞P-gp、FASN、PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB、Bcl-2和cleved-caspase-3的表达情况。结果显示,奥利司他抑制了A549/DDP耐药细胞株的增殖,且具有浓度依赖性。奥利司他与DDP联用增加了耐药株A549/DDP细胞对DDP的敏感性,耐药逆转倍数为5.02。倒置荧光显微镜观察到联合用药组细胞出现了明显的凋亡形态学改变。流式细胞术结果表明,与对照组和单药组比较,两种药物联用后细胞的凋亡率显著提高(p0.05)。Western blotting检测结果显示,相较于其它3组,联合用药组中耐药相关蛋白P-gp表达下调(p0.01),PI3K、p-Akt、NF-κB表达水平均显著降低(p0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降(p0.01),凋亡相关蛋白cleved-caspase-3表达上调(p0.01);虽然FASN的表达在单用奥利司他组及联合用药组中均降低,但这两组间的FASN表达水平并无统计学差异。以上结果表明,奥利司他能够提高A549/DDP耐药细胞株对化疗药物DDP的敏感性,具有逆转肺腺癌细胞耐药性的作用,其机制与降低耐药蛋白P-gp的表达、抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路以及其下游凋亡相关蛋白有关。     

一种新的内源性钠泵抑制因子前海葱苷原A样物质在牛体内的分布

为了建立一种蟾蜍二烯羟酸内酯（ｂｕｆａｄｉｅｎｏｌｉｄｅｓ）前海葱苷原Ａ免疫方法，并对哺乳动物体内的前海葱苷原Ａ样物质进行检测，我们制备了兔和羊前海葱苷原Ａ抗体。利用ＥＬＩＳＡ法检测了一种新的内源性钠泵抑制因子前海葱苷原Ａ样物质在牛的肾上腺、丘脑、心脏、肾脏、肝脏、小脑、骨骼肌和血液中的分布。研究发现这种前海葱苷原Ａ样物质在肾上腺及下丘脑的含量高于其它腺体组织，其具有抑制人红细胞８６Ｒｂ摄取的特性，可与前海葱苷原Ａ抗体发生免疫交叉反应，但几乎不与哇巴因抗体交叉反应，是一种新的类固醇激素     

毛蠓（Clogmia albipunctata）（双翅目,毛蠓科）离心卵之双头端镜映像

低等双翅目昆虫毛蠓卵经离心后产生双头畸型胚胎。与果蝇和另一种毛蠓不同，在７００个离心卵中，没有出现一个双腹畸型胚胎。根据受精后不同时间卵离心实验结果，推断双头畸型形成的敏感期在卵裂中期或更早。对双翅目不同种类昆虫的比较分析结果，为双翅目昆虫进化过程中图式形成机制的岐异提供了资料。