猪肝酯酶催化苯乙二醇环碳酸酯水解最佳反应条件的研究

猪肝酯酶是手性合成中重要的水解酶,在猪肝酯酶的催化下,苯乙二醇环碳酸酯发生水解,生成苯乙二醇。实验围绕影响猪肝酯酶催化反应活性的4个主要因素进行了系统研究,得到了最优的酶浓度（15g/L）、pH值（8.0）、温度（25~30℃）及有机溶剂种类和浓度（二氧六环,65%v/v）,为猪肝酯酶催化苯乙二醇环碳酸酯反应的进一步研究奠定了基础。     

用猪肝进行DNA的粗提取

人民教育出版社生物自然室编著的全日制普通高级中学教科书(试验修订本·必修)<生物>第二册中要求学生做"DNA的粗提取与鉴定"实验,实验材料是鸡血细胞液1.由于用鸡血细胞液为材料,实验成本高,且实验步骤繁多、操作时间长,有些学生当堂实验课不能完成,影响实验效果.     

猪肝酯酶在甲醇酵母中的克隆与表达

猪肝酯酶（Pig Liver Esterase,PLE）是手性合成工业中最常用的三种生物催化剂之一,它的生化提取物是多种同工酶（α、β和γ亚基）的混合物,而它的单一组分（7亚基）有很高的手性拆分活性。为获得重组PLE,从猪肝提取总RNA,经RT—PCR得到γ亚基目的基因,并利用pPIC9K质粒构建成pPIC9K—PLE表达载体,转化到Pichia pastoris中,转化细胞株摇瓶发酵表达重组PLE达450mg／L．活性染色证明分子量略低于天然酶。     

猪肝过氧化氢酶提取条件的研究

采用水浸提法提取猪肝过氧化氢酶。选择浸提时间、温度、料水比作为单因素进行梯度实验,确定其条件范围,再通过进一步的正交实验得到猪肝过氧化氢酶提取条件的优化组合,即料水质量比1：5,浸提温度25℃,浸提时间8h。     

肝源性磷脂酰乙醇胺的分离及其诱导肝癌细胞凋亡的研究

采用氧化铝柱色谱法以95%乙醇-氯仿为洗脱剂分离纯化了肝源性磷脂酰乙醇胺(PE),并采用GF254硅胶板薄层色谱法以氯仿-甲醇-水(65:25:4,体积比)为展开剂检测PE.结果表明,以95%乙醇-氯仿顺序洗脱氧化铝色谱柱中的磷脂时,PE与磷脂酰胆碱(PC)可实现完全分离.采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定了在不同时间点25 μmol/L PE对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,并与子宫颈癌细胞Hela、正常人肝细胞HL7702做比较,发现肝源性PE对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用,且能诱导其发生凋亡.     

激光照射猪肝组织的温度场研究

研究了激光照射下猪肝组织传热过程温度场空间分布的动态规律。采用有限元分析法,利用激光分布公式获得猪肝组织的温度场空间分布,并采用K型热电偶和热电偶放大器来测量猪肝组织表面和内部温度,实验测量结果和模拟结果基本吻合,同时得出血液灌注率和猪肝组织温度的关系。研究结果对于激光临床应用中激光参数的合理选择有一定的指导意义。     

猪肝过氧化氢酶提取条件的研究

过氧化氢酶又称触酶,专一分解过氧化氢,溶于水,几乎不溶于乙醇、氯仿、乙醚。传统方法是从牛、马或人的红细胞、肝、肾中通过选择性沉淀法、缓冲液提取法、层析法等提取过氧化氢酶。本研究以猪肝为原料对过氧化氢酶的提取条件进行了试验。根据猪肝过氧化氢酶在pH5．3—8．0有活性、最适pH为7．0、溶于水的特性,采用水浸提法提取猪肝过氧化氢酶。先选择影响提取的主要因素(浸提时间、温度、料水比)分别作为单因素进行梯度实验,确定其合适范围;再通过进一步的正交实验得到猪肝过氧化氢酶提取条件的优化组合,并综合后处理中固液分离的要求,确定最佳提取条件,即料水比15、浸提温度25℃、浸提时间8h。     

猪肝沙门菌的分离鉴定及耐药性分析

根据动物产品中沙门菌的分离和耐药性分析,来评估猪肝中沙门菌的危害程度。对猪肝沙门菌采用分离培养,并进行药敏纸片扩散试验法分析,得出猪肝中沙门菌耐药现象严重的结论。从猪肝中所分离出的5株沙门菌都有不同程度的耐药存在,而且多重耐药现象也普遍存在,特别是对庆大霉素、利福平、多粘菌素B等常用药物耐药(耐药率100%),建议近期对猪沙门菌病的治疗用药为阿米卡星、头孢克肟、头胞噻肟。这些提示当用药物进行治疗时,必须在用药前对病原菌进行药敏试验,只有这样才能有针对性地筛选敏感药物,以提高疗效。     

猪肝酯酶研究进展

猪肝酯酶是手性合成中重要的水解酶,对它的生化特性研究较早。近几年猪肝酯酶的基因克隆研究也取得了较大进展。重组酶具有选择特异性更高的特点,与生化提取方法相比成本较低廉。基因工程技术的开展使猪肝酯酶在化学工业、生物制药及相关领域中有了更加广泛的应用前景．