梭曼等胆碱酯酶抑制剂对猫膈神经单纤维电活动的影响

在麻醉猫,经推动脉注入梭曼、VX,沙林及乙酰甲胆碱引起呼吸中枢严重抑制的剂量分别为0.5—1、3、15、2001μg/头;但在无麻醉、箭毒麻痹、人工呼吸并用药物保护循环的清醒猫,VX用量要增加十多倍,沙林用量增加2～8倍,棱曼用量不变。在严重抑制剂量的给药早期,梭曼使34.8％动物较早地出现膈神经单纤维放电加强,其每次吸气放电的冲动频率由20～30Hz增至50～80Hz,冲动个数由15～25个/每次放电增至40～60个/每次放电,兴奋持续短、迅速转入抑制且不易自动恢复;VX和乙酰甲胆碱使100％动物出现显著的放电加强,其冲动频率由20～30Hz增至70～130Hz、冲动个数由15～25个/每次放电增至60～80个/第次放电,兴奋持续时间较长、转入抑制慢但自动恢复较快;沙林使76.9％动物出现放电加强,其他表现类似VX。三种胆碱酯酶抑制剂和乙酰甲胆碱共使33/52根单纤维放电发生时相变化。结果表明:梭曼对呼吸中枢作用最强、沙林次之、VX最弱且更似乙酰甲胆碱。     

梭曼对大鼠应激性体温过高的作用及中枢和外周胆碱能受体阻断剂对其效应的影响

目的：观察梭曼对大鼠应激性体温过高的抑制作用以及中枢和外周胆碱能受体阻断剂对其效应的影响。方法：用无线遥测技术测量大鼠的体温,观察皮下注射梭曼、东莨菪碱、甲基东莨菪碱和吡啶斯的明对开放环境中大鼠应激性体温过高的影响。用分光光度技术测定血浆中胆碱酯酶活性。结果：①对照组大鼠在开放实验箱中体温升高达0.96℃,而注射梭曼动物体温只升高了0.55℃。中枢性胆碱能受体阻断剂东莨菪碱几乎完全阻断梭曼对应激体温过高的抑制作用,而外周胆碱能受体阻断剂甲基东莨菪碱则能明显增强梭曼对应激性体温过高的抑制作用。②外周抗胆碱酯酶剂吡啶斯的明能使血浆胆碱酯酶的活性降低至52%,同时明显提高开放环境中大鼠应激性体温过高的反应。甲基东莨菪碱几乎可以阻断吡啶斯的明对应激体温过高反应的影响。结论：神经毒剂梭曼可改变大鼠在开放环境中应激性体温过高的反应能力,其作用主要是通过中枢毒蕈碱型胆碱能通路所致。此外,外周胆碱能神经参与大鼠开放应激性体温过高的形成过程。     

梭曼对大鼠摄食中枢的抑制作用

采用双侧下丘脑外例区（摄食中枢）局部给药的方法,观察梭曼对大鼠摄食中枢的作用。实验结果表明,双侧下丘脑摄食中枢各注入梭曼３μｇ,给药当日大鼠平均摄食量下降６０．９％,抑制作用持续３ｄ,与给药前比较,差别显著（Ｐ＜０．０１或０．０５）;各注入阿托品０．１ｍｇ,平均摄食量下降４１．０％,第２天后恢复正常。胆碱酪酶重活化剂ＨＩ－６与梭曼同时注入下丘脑摄食中枢,或者中枢注入梭曼后立即肌注阿托品、美加明,均可部分对抗梭曼引起的中枢性摄食抑制。说明梭曼抑制大鼠摄食中枢与乙酰胆碱酯酶及乙酰胆碱受体确实有密切关系。     

蟾蜍血清梭曼水解酶（somanase）的纯化及性质的研究

从蟾蜍血清中发现并纯化出了一种与血清载脂蛋白有关的可催化神经性军用毒剂梭曼（０－１,２,２－ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｙｌｍｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｆｌｕｏｒｉｄａｔｅ,ｓｏｍａｎ）的水解酶,此酶全部与高密度脂蛋白（ＨＤＬ）以复合形式存在于血清中。我们经过多种纯化手段,从ＨＤＬ中分离纯化出了酯酶的最小分子量组分,得到了高活性、高纯度的酶蛋白,在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及等电聚焦电泳中呈单一区带,分子量４２ｋＤ,等电点ｐＨ５．２,并证明此酶不是ＨＤＬ中的任何一种已知载脂蛋白,也不是磷脂酶Ａ_２和磷脂酶Ｃ以及存在于ＨＤＬ中的卵磷脂胆固醇酰基转移酶（ＬＣＡＴ）。它是与ＨＤＬ中的主要载脂蛋白ａｐｏＡ_１比较牢固地连接在一起并含量甚微的一种酶蛋白,水解梭曼的Ｋｍ值ｐＨ７．２、３７℃时为３．１３ｍｍｏｌ／Ｌ。可被对氯汞苯甲酸、ＨＣｌ－胍和ＥＤＴＡ－Ｎａ_２所抑制,二硫苏糖醇对酶活性有恢复作用。     

神经肌接头上产生持续性去极化时小终板电位的变化

实验在大鼠膈肌标本上观察梭曼处理后,终板区持续性去极化（ｓｕｓｔａｉｎｅｄｄｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＳＤ）产生时小终板电位（ＭＥＰＰ）的变化,以分析产生ＳＤ的机理。静息时,加入５．５μｍｏｌ／Ｌ梭曼后,ＭＥＰＰ的频率、幅度和下降时间常数分别是加药前的１．８,１．３和３．０倍（Ｐ＜０．０１）。间接强直刺激时,记录到ＳＤ,ＳＤ过程中不仅终板电位消失,ＭＥＰＰ也完全消失。ＳＤ之后一定时间ＭＥＰＰ恢复出现,然后其频率逐渐增高。从ＳＤ开始到ＭＥＰＰ明显恢复的时间与强直刺激参数有关,５０Ｈｚ×１ｓ和５０Ｈｚ×０．１ｓ强直刺激时,分别为２９．７±０．７ｓ和１１．７±３．０ｓ。结果表明,在乙酰胆碱酯酶活性被抑制后,静息时突触前自发ＡＣｈ释放增加;刺激神经时,突触后对ＡＣｈ反应性降低甚至失去反应性,是产生ＳＤ的主要机理。     

不同性别及性腺功能对梭曼引起大鼠低温的影响

目的：研究不同性别及性腺功能对梭曼引起大鼠低温的影响。方法：用数字体温计测量大鼠的结肠温度,观察梭曼引起正常雄性和雌性大鼠低温反应的性别差异以及切除性腺后对其作用的影响。结果：①雌性大鼠对梭曼引起的低温反应比雄鼠更敏感。②切除雄性大鼠睾丸后能明显提高对梭曼低温反应的敏感性,而切除卵巢的雌性大鼠对梭曼的低温反应与模拟手术组无明显差异。结论：雄性和雌性大鼠对梭曼敏感性的性别差异主要取决于睾丸的功能。     

蟾蜍血清梭曼水解酶的酶学性质研究

蟾蜍血清梭曼水解酶已被纯化。该酶有两个温度作用高峰,最适为ｐＨ１０,其次为ｐＨ７。最适温度为３０℃。以梭曼为底物,在ｐＨ７．７３条件下测定其米氏常数为５．８６４ｍｍｏｌ／Ｌ,最大反应速度为６９２μｍｏｌ／Ｌ。过高的底物浓度对酶活性有抑制作用。Ｍｇ＋＋、Ｃａ＋＋对酶有激活作用,而Ｎｉ＋＋、Ｃｕ＋＋、Ｆｅ＋＋、Ｎａ＋、Ｋ＋对酶活性无明显影响。     

蟾蜍血清梭曼水解酶（somanase）的纯化及性质的研究

从蟾蜍血清中发现并纯化出了一种与血清载脂蛋白有关的可催化神经性军用毒剂梭曼的水解酶,此酶全部与高密度脂蛋白以复合形成存在于血清中,我们经过多种纯化手段,从ＨＤＬ中分离纯化出了酯酶的最小分子量组分,得到了高活性、高纯度的酶蛋白,在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及等电聚焦电泳中呈单一区带,分子量４２ｋＤ,等电点ｐＨ５．２并证明此酶不是ＨＤＬ中的任何一种已知载脂蛋白,也不是磷脂酶Ａ２和磷脂酶Ｃ以及存在于ＨＤ